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本技術成果通過整合電化學、微機電和自動化控制技術，開發(fā)了一套適合于 出入境口岸動物疫病等的現(xiàn)場快速檢測設備 便攜式動物疫病現(xiàn)場檢測儀。檢 測儀在結構上不同于現(xiàn)有的進口濁度儀，采用自主開發(fā)的微機電加熱技術保證疫 病基因的高效等溫擴增，同時集成可視化微型紫外檢測模塊使得結果的觀察和判 斷更為方便。該儀器具備穩(wěn)定的溫度控制電路、便捷的結果檢測方式，體積小方 便攜帶，且具有自主知識產權，避免了使用價格昂貴，且不便攜帶的實時濁度儀、 PCR儀或水浴鍋，適合于出入境口岸對動物疫病等進行現(xiàn)場的快速診斷或篩查。實驗樣機采用鏈置換聚合酶引導下的環(huán)介導等溫擴增反應生成大量焦磷酸 鎂沉淀和DNA產物的原理，包括四路并行的單色激光器和二極管陣列光電檢測 器，實現(xiàn)對樣本中的生物基因（DNA）進行實時檢測和分析。同時，利用磁珠 法提取核酸的基本理論，研制了手持式核酸提取裝置，對細胞中的核酸（DNA 和RNA）完成純化和提取，完成的樣本前處理工作，整個過程不需要離心機，單 個提取時間不超過30分鐘。從樣本前處理到后續(xù)的基因檢測，完成單個樣本檢 測的平均時間不超過60分鐘，可以實現(xiàn)對食品、農產品、肉制品、水產品中各類 病原微生物的快速檢測和現(xiàn)場查驗。

本發(fā)明公開了一種水稻側根控制基因OsIAA11編碼的蛋白質,其具有SEQ?ID?NO:2所示的氨基酸序列。本發(fā)明還同時公開了編碼上述蛋白質的基因,該基因具有SEQ?ID?NO:1所示的核苷酸序列。本發(fā)明的基因能用于構建具有水稻側根控制功能的轉基因水稻。由于側根的正常發(fā)生發(fā)育對維持水稻生長發(fā)育以及高產穩(wěn)產是必不可少的,而且該基因僅影響側根發(fā)生發(fā)育,因此在分子育種中存在較大的應用潛力。

通過對個體全基因組單核苷酸多態(tài)性（SNP）信息與疾病表型的全基因組關聯(lián)分析，以及兩階段獨立人群驗證，最終在2942例鼻咽癌患者中發(fā)現(xiàn)了位于14號染色體上CEP128 基因啟動子區(qū)的變異位點rs17111237與放射性腦損傷的發(fā)生存在顯著關聯(lián)，攜帶危險型等位基因的個體CEP128基因的表達水平顯著較低。特別地，聯(lián)合臨床危險因素，攜帶危險基因型的高危鼻咽癌患者放射性腦損傷五年發(fā)病風險為攜帶保護基因型的低?；颊叩?倍。CEP128基因編碼中心體蛋白，在纖毛形成和細胞周期調控中起著至關重要的作用。研究表明，CEP128可通過與CASK、CEP72等蛋白相互作用，維持纖毛的功能并調節(jié)細胞對射線等外界刺激的反應。我們進一步以放射性腦損傷的主要靶細胞——神經膠質細胞為模型探究了CEP128基因的功能，通過克隆形成實驗發(fā)現(xiàn)敲減CEP128基因的表達顯著增加了神經膠質細胞的放射敏感性。

開發(fā)了一種還原敏感的多功能載體材料，載體的疏水性嵌段包載抗腫瘤光動力藥物Ce6，攜帶NTA基團的嵌段則通過NTA和Cas9蛋白末端His標簽之間的特異性結合高效負載Cas9蛋白/sgRNA復合物，然后通過靜電組裝在外層引入靶向腫瘤組織的iRGD分子。這樣的載體結構設計和藥物聯(lián)合輸送為實現(xiàn)腫瘤組織特異性的基因編輯和聯(lián)合治療提供了可行性。納米藥物靶向輸送至腫瘤細胞后，在近紅外光的輻照下，Ce6產生的活性氧使溶酶體破裂，使納米藥物從溶酶體中逃逸出來，NTA和載體聚合物之間的二硫鍵可響應胞質內的谷胱甘肽等還原劑而斷裂，從而將Cas9蛋白/sgRNA復合物從載體上釋放出來，執(zhí)行基因編輯功能。在正常的組織中，由于沒有近紅外光的輻照，Cas9蛋白/sgRNA復合物難以從溶酶體中逃逸，無法執(zhí)行基因編輯的功能。通過紅外光輻照和還原敏感設計實現(xiàn)了腫瘤組織特異的基因編輯。此外，腫瘤細胞在受到Ce6所生成活性氧攻擊時，會上調Nrf2（一種活性氧代謝的關鍵蛋白）的表達，提高腫瘤細胞對活性氧的耐受性。使用靶向Nrf2基因的sgRNA，可以通過聯(lián)合輸送的Cas9蛋白/sgRNA復合物使Nrf2基因失活，提高腫瘤細胞對活性氧的敏感性?？偠灾?，通過多功能載體聯(lián)合輸送Ce6和Cas9蛋白/sgRNA復合物，一方面實現(xiàn)了腫瘤特異性的基因編輯，另一方面也實現(xiàn)了基因編輯和光動力治療的聯(lián)合治療，協(xié)同提高了基因編輯的特異性和治療效果，為基因編輯技術的發(fā)展提供了一個新的方向。

在基因治療中，載體將治療基因導入靶細胞，使其與宿主染色體整合為一體或在宿主細胞中表達特定蛋白質，從而治療因基因異?；蛉毕荻鴮е碌募膊?。因此，基因治療成敗的關鍵在于基因遞送系統(tǒng)?；蛑委熓袌鑫磥硎袌隹臻g巨大。據(jù)Clinical Trial數(shù)據(jù)，目前基因藥物以病毒載體為主，約占所有載體的70%，未來病毒載體市場前景十分廣闊。2017年FDA批準羅氏公司的基于AAV病毒載體的基因療法Luxturna用來治療患有特定遺傳性眼疾的兒童和成人患者。從實驗室簡單的基因過表達、體外的基因干擾、基因編輯（CRISPR/Cas9）技術 、CAR-T免疫療法技術、到腫瘤、神經、代謝、眼科、心臟、肝臟、肺等臨床前動物和臨床人體試驗的研究，基因病毒載體的應用無處不在。我國離世界先進水平在技術上存在巨大差距，基因運載工具由于開發(fā)難度大，生產工藝要求高，目前我國和國際先進技術相比還存在非常大的差距，國內基因治療藥物的研發(fā)還處于起步階段，還存在巨大的市場需求沒有得到滿足，而目前美國FDA已有批準的的基因治療藥物收費非常高昂。    目前采用病毒載體的基因療法已經成功用于血友病，先天性黑矇，脊髓肌肉萎縮癥等單基因疾病的治療。

產品詳細介紹  由于qPCR是實時定量檢測致病病原體基因核酸，因此它比化學發(fā)光、實時分辨、蛋白芯片等免疫學方法更具獨到優(yōu)勢。   基因擴增儀實時熒光定量pcr儀|熒光定量pcr儀價格|abi熒光定量pcr儀|熒光定量pcr|熒光定量pcr原理|實時熒光定量pcr|熒光定量pcr技術|熒光定量pcr結果分析|實時熒光定量pcr技術|熒光定量pcr步驟|基因擴增儀-實時熒光定量pcr儀價格原理科研型TC988C（48孔） 產品編號：TC988C   產品規(guī)格：48孔X0.2 產品簡介：由于qPCR是實時定量檢測致病病原體基因核酸，因此它比化學發(fā)光、實時分辨、蛋白芯片等免疫學方法更具獨到優(yōu)勢。 產品詳情：僅供科研使用 國際領先水平的TC988型實時熒光定量PCR儀適用于臨床及科研以聚合酶鏈式反應為特征的、以實時熒光定量檢測分析DNA/RNA為目的的病原體檢測及基因分析。 動物疾病檢測：禽流感、新城疫、口蹄疫、豬瘟、沙門菌、大腸埃希菌、胸膜肺炎放線桿菌、寄生蟲病等、炭疽芽孢桿菌。 食品安全：食源微生物、食品過敏源、轉基因、乳品企業(yè)阪崎腸桿菌等檢測。 科學研究：醫(yī)學、農牧、生物相關分子生物學定量研究。 應用行業(yè)：大學及研究所 技術原理： 標記有熒光素的Taqman探針與模板DNA混合后，完成高溫變性，低溫復性，適溫延伸的熱循環(huán)，并遵守聚合酶鏈反應規(guī)律，與模板DNA互補配對的Taqman探針被切斷，熒光素游離于反應體系中，在特定光激發(fā)下發(fā)出熒光，隨著循環(huán)次數(shù)的增加，被擴增的目的基因片段呈指數(shù)規(guī)律增長，通過實時檢測與之對應的隨擴增而變化熒光信號強度，求得CT值，同時利用數(shù)個已知模板濃度的標準品作對照，即可得出待測標本目的基因的拷貝數(shù)。 技術參數(shù)： 標本載體 0.2ml薄壁PCR離心管 標本數(shù)量 標本數(shù)量48個，包括4個標準品 試    劑 SYBR Green I，F(xiàn)AM，Tex Red，F(xiàn)ITC等熒光染料，開放式PCR試劑 反應體系 10-100μL 建議質控 四個陽性標準品、陰性對照   指標 熒光激發(fā)波長 470nm 熒光發(fā)射波長 530nm，640nm，710nm 570nm，605nm 熒光檢測方式 光開關陣列組合光電倍增管PMT方式? 控溫范圍 4.0℃-99.0℃? 熱蓋溫度 100℃～120℃? 升/降溫速度 ≥4.0℃/S（Max）? 溫度均勻性 ≤±0.3℃? 溫度精確度 ≤±0.3℃? 溫度顯示精度 0.1℃? 檢測范圍 101～1010DNA/RNA copy/ml CT值重復性誤差 CV≤2.1％?重要 核酸精度相關系數(shù) R≥0.997?重要   軟件 溫階 1～9 循環(huán) 1～99 保溫時間 1～9999秒     +.3.0.0.0..366999文件 1～9個連接 升級方式 遠程硬件內控軟件升級   系統(tǒng)接口 RS-232C串行接口，雙向數(shù)據(jù) 主機操作系統(tǒng) Windows2000/XP 產品外形尺寸 50cm× 40cm × 35cm 產品重量 25kg 使用環(huán)境 溫度5～40℃，相對濕度≤80％ 使用電源 AC220 × （1±10%）V,50 × （1±2%）HZ 功耗 1100VA   多規(guī)格 提供96孔，多通道/多色、36孔等不同規(guī)格產品 產品特點： 專利技術應用實現(xiàn)快速高效均衡擴增檢測由光開關陣列、自聚焦透鏡和尾纖準直器及變增益微光O/E裝置組成的MEMS有機整體，在以16位單片機為核心的電控裝置管理下，能在毫秒級時間內完成多個標本快速均衡掃描檢測，避免了機械掃描方式或CCD掃描方式引起的時間滯后或漸暈誤差。實現(xiàn)標準樣本的PCR熱循環(huán)擴增及高通量實時熒光激發(fā)和定量檢測。  1.走在PCR技術的前列 在PCR儀研發(fā)和市場化領域中歷史悠久； 將標準化的PCR檢測技術成功廣泛用于臨床；  2.快速實時PCR技術實現(xiàn)了DNA/mRNA檢測的快速性 實時檢測啟用熒光探針標記特定核酸的93 方法使準確性更高； 簡化了傳統(tǒng)PCR方法； 使用最少的樣本量，在一小時左右出結果； 3.簡便閉管分析使您完成加樣后就無須再接觸樣本 減少樣本消耗殆盡風險； 縮短了出報告時間； 簡化了試驗步驟； 4.提高了用戶高級應用的靈活性 提供了用戶自定義PCR操作平臺； 建立您的用戶自定義應用； 分析用戶自定義試驗； 相關鏈接：http://www.tocan.cn/index.php?do=product&CategoryID=1004   詳情請鏈接網址：www.tocan.cn聯(lián)系電話：021-51863860、18917331948   聯(lián)系QQ：278622785                          傳　　真：021-55236681 公司地址：上海市翔殷路165號A區(qū)319室 郵編：200433

本發(fā)明涉及豬ApoE基因敲除載體及其構建方法與應用，本發(fā)明的載體命名為pApoEKO-DTA-M，其核苷酸序列如SEQ?ID?NO : 1所示，其構建方法包括如下步驟：(1)擴增豬ApoE基因側翼序列作為基因打靶的長臂和短臂；(2)短臂與打靶載體ploxp分別酶切、連接后，再與長臂連接；去除tk，與dta基因片段連接；(3)在長短臂之間插入特異性啟動子Cre，構建得到ApoE基因敲除載體。本發(fā)明的豬ApoE基因敲除載體可用于培育敲除了ApoE基因的豬，用于動脈硬化模型動物的制備。

本發(fā)明公開了一種抗蟲融合基因,該基因包括從5’-3’依次含有編碼BT晶體毒素Cry1的核苷酸序列和編碼Cry9Aa毒素的核苷酸序列;且上述2個核苷酸序列位于同一個開放閱讀框內。該抗蟲融合基因包括Cry1Aa、Cry1Ab、Cry1Ac、Cry1Aa的修飾基因、Cry1Ab的修飾基因或Cry1Ac的修飾基因;還包括Cry9Aa或者Cry9Aa經過修飾的基因。本發(fā)明還同時公開了上述抗蟲融合基因所編碼的融合蛋白,該融合蛋白從N端至C端依次為Cry1晶體毒素和Cry9Aa毒素。本發(fā)明的融合蛋白能用于制備轉基因抗蟲農作物。

本發(fā)明涉及幾丁質合酶，特別涉及卵菌門中的幾丁質合酶，其氨基酸序列為與如SEQ ID No.4所示的氨基酸序列在相似性在75％以上，優(yōu)選在80％以上，更優(yōu)選在90％以上，最優(yōu)選在95％以上且具有與如SEQ ID No.4所示的氨基酸序列相同功能的氨基酸序列。所述幾丁質合酶的活性水平能夠調節(jié)卵菌的活性孢子囊和活性游動孢子的產量從而影響卵菌的致病力或寄主的發(fā)病程度。