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01.成果簡(jiǎn)介 地中海貧血癥，又稱珠蛋白生成障礙性貧血癥，是一組遺傳性溶血性貧血疾病，由血紅蛋白中一種或一種以上珠蛋白鏈的缺失或不足導(dǎo)致。珠蛋白鏈包括：γ、δ、ε和β珠蛋白基因組成“β基因族”，ζ和α珠蛋白組成“α基因族”，相應(yīng)的，地中海貧血癥分為α型、β型、δβ型和δ型4種，其中以β地中海貧血癥和α地中海貧血癥較為常見。 地中海貧血癥的常規(guī)治療方法包括：一般性治療、紅細(xì)胞輸注、鐵螯合劑去鐵治療、脾切除、造血干細(xì)胞移植、基因活化治療等，其中，輸血治療和去鐵治療是目前最重要的兩種治療方法。然而，供體缺乏、排異反應(yīng)、藥物副反應(yīng)等因素影響了上述方法的應(yīng)用。 本項(xiàng)成果利用歸巢內(nèi)切酶I-SceI的特異性低毒性以及TALE的特異性DNA識(shí)別域，依據(jù)β地中海貧血癥的β-珠蛋白基因序列，首先改造I-SceI和TALE，使其分別可以特異性識(shí)別14bp和18bp的β珠蛋白DNA序列，然后使二者融合，從而構(gòu)建出可以識(shí)別β珠蛋白32bp DNA序列的融合型內(nèi)切酶TALE-I SceI，并利用β-地中海貧血疾病患者造血干細(xì)胞為模型，對(duì)其突變基因進(jìn)行修復(fù)，驗(yàn)證了本項(xiàng)成果的安全性和實(shí)用性。 圖1 融合型內(nèi)切酶TALE-I SceI02.應(yīng)用前景 經(jīng)過細(xì)胞實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，本項(xiàng)目成果構(gòu)建的嵌合核酸酶可以在體外β-地中海貧血疾病患者造血干細(xì)胞中發(fā)揮作用，有望在臨床中得到應(yīng)用。03.知識(shí)產(chǎn)權(quán) 本項(xiàng)成果已申請(qǐng)1項(xiàng)發(fā)明專利，并已授權(quán)。04.團(tuán)隊(duì)介紹 本項(xiàng)目負(fù)責(zé)人為研究員、博士生導(dǎo)師，擔(dān)任中國(guó)自然科學(xué)基金委重大項(xiàng)目顧問及基金評(píng)委、中國(guó)科技部973項(xiàng)目顧問及基金評(píng)委，曾在多個(gè)國(guó)際權(quán)威期刊上發(fā)表SCI論文20余篇。05.合作方式 投融資。06.聯(lián)系方式 郵箱：zhangxinrui@tsinghua.edu.cn

本發(fā)明公開了一種固定化的洋蔥伯克霍爾德菌脂肪酶及其制備方法。所述固定化的洋蔥伯克霍爾德菌脂肪酶，包括碳納米管基質(zhì)和洋蔥伯克霍爾德菌脂肪酶，所述洋蔥伯克霍爾德菌脂肪酶通過親和吸附和/或共價(jià)結(jié)合的方式結(jié)合在碳納米管基質(zhì)的開放端口、表面和內(nèi)壁。所述制備方法包括以下步驟：(1)硫酸超聲處理碳納米管；(2)制備碳納米管與洋蔥伯克霍爾德菌脂肪酶混合液；(3)將碳納米管與洋蔥伯克霍爾德菌脂肪酶混合液在 4℃至 60℃下，振蕩反應(yīng)，獲得所述固定化的洋蔥伯克霍爾德菌脂肪酶。本發(fā)明提供的固定化的洋蔥伯克霍爾德菌脂肪酶增

近日，藥學(xué)院鄒懿教授和張霄教授課題組合作，在國(guó)際知名期刊JACS在線發(fā)表了題為“DiarylEtherFormationbyaVersatileThioesteraseDomain”（DOI：10.1021/jacs.2c02813）的研究論文，揭示了二芳基醚藥物骨架的全新酶學(xué)合成途徑。

該成果涉及食品生物等高新技術(shù)領(lǐng)域，是一種具有抑制腐敗作用的低值魚蛋白深度酶解的方法。通過創(chuàng)造性地在低值魚酶解過程中不斷通入凈化空氣或氧氣，抑制和殺滅引致水解物腐敗變質(zhì)的厭氧菌；利用內(nèi)切蛋白酶與外切蛋白酶的協(xié)同作用，明顯提高了魚蛋白水解效率，可得水解度大于65%，氮回收率大于85%的低值魚蛋白深度酶解液，顯著降低了低值魚酶解成本。 該成果避免現(xiàn)有技術(shù)采用化學(xué)殺菌劑所導(dǎo)致的對(duì)蛋白酶活性的抑制、化學(xué)殺菌劑殘留的問題，以及使用熱殺菌方法所導(dǎo)致的降低魚蛋白水解效率的問題，解決了低值魚酶解過程易

目前臨床上抗哮喘用藥主要包括糖皮質(zhì)激素類藥物與β2受體激動(dòng)劑（例如鹽酸丙卡特羅（美普清）），但這兩類藥物存在較大的副作用。糖皮質(zhì)激素類藥物可引起水、鹽、糖、蛋白質(zhì)及脂肪代謝紊亂；減弱機(jī)體抵抗力，阻礙組織修復(fù)，延緩組織愈合；抑制兒童生長(zhǎng)發(fā)育。β2受體激動(dòng)劑可引起心律失常、肌肉震顫、水鹽代謝紊亂。臨床急需療效確切、副作用小的新藥。 氣道高反應(yīng)性是指氣管、支氣管本身對(duì)各種刺激，包括特異性抗原刺激和非特異性刺激，如物理、化學(xué)刺激，呈現(xiàn)過度反應(yīng)，是支氣管哮喘病人區(qū)別于正常人的重要特征。CD38分子表達(dá)與分布在氣道平滑肌等。通過CD38分子的酶催化作用生成的環(huán)腺苷二磷酸核糖(cyclic adenosine diphosphate ribose, cADPR)來(lái)調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)Ca2+的釋放而調(diào)節(jié)細(xì)胞收縮。氣道平滑肌的收縮能力主要依靠于平滑肌細(xì)胞內(nèi)Ca2+的濃度，CD38分子可以調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)Ca2+的濃度進(jìn)而影響氣道平滑肌的收縮，在哮喘的發(fā)病機(jī)制中起到非常重要的作用。 本項(xiàng)目重點(diǎn)研究了兩種小分子CD38抑制劑，其中一種化合物即5-(3-苯基丙酰氨基)-N-(4-乙氧羰基苯基)-1H-3-吲哚甲酰胺治療能夠減輕臭氧攻擊所造成氣道與肺泡病理改變，炎癥反應(yīng)、氧化損傷及氣道高反應(yīng)，且無(wú)明顯血液毒性與全身性毒副作用。該化合物作為CD38酶抑制劑，可通過抑制Ca2+釋放舒張氣管平滑肌，對(duì)癥治療氣道高反應(yīng)性疾??；我們利用臭氧制作小鼠氣道高反應(yīng)模型，同時(shí)給予該化合物的乳化劑灌胃治療，發(fā)現(xiàn)經(jīng)該化合物治療的小鼠氣道阻力明顯降低、動(dòng)態(tài)肺順應(yīng)性明顯增加、肺病變程度減輕。

本發(fā)明涉及生物處理技術(shù)領(lǐng)域，具體公開了一種細(xì)菌來(lái)源的漆酶及其在降解聚氨酯塑料中的應(yīng)用。本發(fā)明發(fā)現(xiàn)來(lái)源于枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis 168)細(xì)菌漆酶，在大腸桿菌中表達(dá)后，通過水解PU中的酯鍵和氨基甲酸酯鍵，對(duì)兩種聚酯型聚氨酯底物均具有一定的降解能力。本發(fā)明為不僅豐富了PU塑料酶降解資源庫(kù)，并為塑料酶法回收技術(shù)奠定了研究基礎(chǔ)。

以 L-抗壞血酸棕櫚酸酯為代表的抗壞血酸(或異抗壞血酸)酯類衍生物是一 大類脂溶性抗氧化劑，3CLpro 抑制劑的合成工藝 其酶法生產(chǎn)工藝已經(jīng)成熟，其中 L-抗壞血酸棕櫚酸酯(酶法)已經(jīng)作為一款 新型的食品添加劑起草了專用的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)并將在近期獲得通過。 投資 5000 萬(wàn)元建設(shè)一套年產(chǎn) 1500 噸抗氧化劑的裝置，按 150 元/kg 的售價(jià)計(jì)，年產(chǎn)值可達(dá) 2 個(gè)億以上，利潤(rùn)在 8000 萬(wàn)元以上。 

本項(xiàng)目從中國(guó)傳統(tǒng)白酒大曲中篩選獲得了適用于面包烘焙的華根霉（Rhizopus chinensisCCTCC M201021）脂肪酶，在此基礎(chǔ)上利用基因工程、蛋白質(zhì)工程等現(xiàn)代生物技術(shù)，改造得到具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的面包烘焙用脂肪酶催化劑，通過發(fā)酵調(diào)控技術(shù)，開發(fā)生產(chǎn)廉價(jià)的新型脂肪酶制劑，緊跟市場(chǎng)需求，利用高效定向進(jìn)化技術(shù)進(jìn)一步提升改造酶的催化性能，并在技術(shù)上建立與之相應(yīng)的應(yīng)用技術(shù)路線，從而綜合提高我國(guó)食品領(lǐng)域的科技水平，對(duì)于我國(guó)經(jīng)濟(jì)和社會(huì)發(fā)展具有重大意義。 創(chuàng)新要點(diǎn) 獲得具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的面包烘焙用脂肪酶催化劑，建立了定向進(jìn)化文庫(kù)構(gòu)建新方法，顯著提高了酶的活性和熱穩(wěn)定性，開發(fā)獲得的產(chǎn)品性能優(yōu)，成本低。

近年來(lái)，濫用抗生素產(chǎn)生的耐藥性問題日益嚴(yán)重，對(duì)人類疾病造成了巨大的威脅。尋找新的可替代抗生素的新藥迫在眉睫。抗菌肽（Antimicrobial peptides），是生物體經(jīng)誘導(dǎo)產(chǎn)生的一類具有抗菌活性的小分子多肽，來(lái)源廣泛，其分子量小，大約在 3~6 kD 之間，有耐熱、 耐酸性強(qiáng)，水溶性好，快速的殺菌能力等特點(diǎn)（Hancock REW，Scott MG. Proc Natl AcadSci USA，2000，97（16）：8856~ 8861）?？咕牡目咕鷻C(jī)制不同于普通抗生素，抗菌機(jī)制一般包括①

XM/ALS1000A高級(jí)心肺復(fù)蘇、AED除顫訓(xùn)練模擬人 （計(jì)算機(jī)控制/無(wú)線版） ? 執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)：執(zhí)行美國(guó)心臟學(xué)會(huì)(AHA)2015國(guó)際心肺復(fù)蘇(CPR)＆心血管急救(ECC)指南標(biāo)準(zhǔn)。 XM/ALS1000A高級(jí)心肺復(fù)蘇AED除顫訓(xùn)練模擬人（計(jì)算機(jī)控制/無(wú)線版）由全身模擬人、計(jì)算機(jī)控制系統(tǒng)、AED模擬除顫訓(xùn)練儀組成，可進(jìn)行CPR訓(xùn)練考核、AED模擬除顫訓(xùn)練等操作。 ? 一、產(chǎn)品特點(diǎn)： ■ 本模型為成年男性整體人，采用高分子材質(zhì)，膚質(zhì)仿真度高。 ■ 解剖標(biāo)志明顯，具有仿真的頭頸部，頭部可水平轉(zhuǎn)動(dòng)，有利于清除異物。 ■ 胸部體表標(biāo)志明顯（胸骨角、乳頭、劍突等），便于胸外按壓的操作定位。 ■ 可觸及頸動(dòng)脈搏動(dòng)，死亡狀態(tài)下，頸動(dòng)脈搏動(dòng)消失，搶救成功后，頸動(dòng)脈搏動(dòng)恢復(fù)，頸動(dòng)脈搏動(dòng)與有效按壓相關(guān)聯(lián)。 ■ 心肺復(fù)蘇術(shù)：仰臥位，頭可后仰，便于清除呼吸道異物，可進(jìn)行胸外按壓。 ■ 可進(jìn)行口對(duì)口人工呼吸或者使用簡(jiǎn)易呼吸器輔助呼吸，有效人工呼吸可見胸廓起伏。 ■ 瞳孔示教：死亡狀態(tài)下，模擬人瞳孔散大，搶救成功后，雙側(cè)瞳孔由散大變?yōu)檎！? ■ 模擬人和計(jì)算機(jī)之間通信方式：藍(lán)牙無(wú)線通信。 ■ 模擬人手臂關(guān)節(jié)靈活，可進(jìn)行搬運(yùn)練習(xí)。 ? 二、軟件功能： ■ 軟件依據(jù)《美國(guó)心臟學(xué)會(huì)2015國(guó)際心肺復(fù)蘇心血管急救指南標(biāo)準(zhǔn)》的操作標(biāo)準(zhǔn)對(duì)心肺復(fù)蘇操作進(jìn)行評(píng)價(jià)。 ■ 軟件形象的展示了心肺復(fù)蘇急救流程，圖文并茂的介紹了急救鏈中的每項(xiàng)操作要點(diǎn)。 ■ 操作模式：訓(xùn)練、考核、實(shí)戰(zhàn)三種操作模式，每種模式均可自行設(shè)置操作時(shí)間、按壓次數(shù)、按壓深度、吹氣次數(shù)、吹氣量、CPR循環(huán)次數(shù)等，老師也可調(diào)節(jié)和變更按壓和通氣的考核標(biāo)準(zhǔn)值，建立符合當(dāng)次考核狀態(tài)的心肺復(fù)蘇標(biāo)準(zhǔn)。 ■ 學(xué)員管理：可自由編輯學(xué)員名稱及編號(hào)，用于存檔。 ■ 人工口對(duì)口呼吸(吹氣)時(shí)： · 動(dòng)態(tài)條碼指示燈顯示潮氣量大小：吹入的潮氣量正確由條碼綠燈顯示，吹入的潮氣量過小由條碼黃燈顯示，吹入的潮氣量過大由條碼紅色指示燈動(dòng)態(tài)反饋顯示潮氣量大小。 · 電子計(jì)數(shù)顯示：詳細(xì)記錄吹氣正確和錯(cuò)誤的次數(shù)（吹氣量過大、吹氣力量過小）。 · 語(yǔ)音提示：中文語(yǔ)音提示，詳細(xì)提示吹氣錯(cuò)誤的具體原因以便訓(xùn)練者及時(shí)改正。 ■ 人工手位胸外按壓時(shí)： · 動(dòng)態(tài)條碼指示燈顯示按壓深度：按壓深度正確由條碼綠燈顯示，按壓深度過小由條碼黃燈顯示，按壓深度過大由條碼紅色指示燈動(dòng)態(tài)反饋顯示按壓深度。 · 電子計(jì)數(shù)顯示：詳細(xì)記錄按壓正確和錯(cuò)誤的次數(shù)（按壓力量過大、按壓力量過小、按壓位置錯(cuò)誤）。 · 語(yǔ)音提示：中文語(yǔ)音提示，詳細(xì)提示按壓錯(cuò)誤的具體原因，以便訓(xùn)練者及時(shí)改正。 ■ 全程心電圖顯示： · 搶救前：顯示為瀕臨死亡的心電圖, 呼吸圖消失。 · 搶救中：進(jìn)行按壓操作時(shí)，顯示按壓心電圖，頻率與按壓頻率一致，呼吸監(jiān)護(hù)顯示潮氣操作圖形。 · 搶救成功后：顯示為竇性心律，呼吸恢復(fù)正常。 ■ 依據(jù)《2015年美國(guó)心臟協(xié)會(huì)心肺復(fù)蘇及心血管急救指南》的操作標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)心肺復(fù)蘇操作進(jìn)行評(píng)價(jià)，操作達(dá)標(biāo)，模擬人復(fù)活，操作未達(dá)標(biāo)，模擬人死亡。 ■ 模擬人3D動(dòng)畫：正常狀態(tài)時(shí)，模擬人3D動(dòng)畫有瞬目，休克或死亡狀態(tài)時(shí)3D動(dòng)畫為閉眼。 ■ 成績(jī)單所有操作結(jié)果數(shù)據(jù)以表格形式清晰顯示，并可保存成績(jī)單，可連接通用打印機(jī)對(duì)成績(jī)單進(jìn)行打印。 ■ 按壓與人工呼吸比：30：2（單人或雙人）。 ■ 操作周期：先30次按壓再2次人工吹氣，30：2五個(gè)循環(huán)周期CPR操作。 ■ 操作頻率：100-120次/分。 ■ 操作時(shí)間：以秒為單位計(jì)時(shí)。 ? 三、AED模擬除顫功能： ■ 自動(dòng)體外模擬除顫儀設(shè)計(jì)符合人機(jī)工程學(xué)，打開盒蓋則設(shè)備開機(jī)，關(guān)閉盒蓋則設(shè)備自動(dòng)關(guān)機(jī)，具有單鍵除顫功能操作，面蓋背部可存放AED電極貼片。 ■ 模擬急救現(xiàn)場(chǎng)AED的工作流程，但無(wú)高壓電擊除顫工作，全程中文語(yǔ)音提示，指導(dǎo)學(xué)員熟悉BLS的工作流程及AED使用要點(diǎn)。 ■ 自動(dòng)偵測(cè)除顫電極片的貼敷位置是否正確，學(xué)員通過反復(fù)使用模擬AED可以熟悉電極片貼敷位置。 ■ 系統(tǒng)內(nèi)置12個(gè)腳本（一次除顫的室顫、多次除顫的室顫、反復(fù)顫動(dòng)的室顫、發(fā)現(xiàn)并解決故障-電極片松動(dòng)、發(fā)現(xiàn)并解決故障-觸碰病人、發(fā)現(xiàn)并解決故障-電池電量低、非除顫心律、二次除顫的室顫、三次除顫的室顫、室顫、發(fā)現(xiàn)并解決故障-電極片松動(dòng)-電池電量低、發(fā)現(xiàn)并解決故障-觸碰病人-電池電量低），可模擬不同情景的急救現(xiàn)場(chǎng)情況，并且全程語(yǔ)音提示指導(dǎo)訓(xùn)練者完成BLS訓(xùn)練，可以根據(jù)需要暫停或繼續(xù)BLS過程。 ■ 故障模擬功能：通過遙控器選擇可以進(jìn)行情景模擬的語(yǔ)音提示，包括：除顫過程有其他人接觸病人身體、貼片位置錯(cuò)誤、貼片位置正確、無(wú)需除顫、需要除顫、機(jī)器故障、電池電量低等。 ■ 電量管理功能：AED訓(xùn)練器自動(dòng)偵測(cè)電池電量，當(dāng)電池電量不足時(shí)，系統(tǒng)將有“電池電量低，請(qǐng)更換”語(yǔ)音提示。在兩次AED期間，系統(tǒng)處于待機(jī)狀態(tài)，進(jìn)入省電模式，開機(jī)后如果3分鐘內(nèi)無(wú)任何操作，系統(tǒng)將自動(dòng)進(jìn)入關(guān)機(jī)狀態(tài)。 ? 四、標(biāo)準(zhǔn)配置： ■ 心肺復(fù)蘇全身人體模型：1臺(tái) ■ 手拉推式硬塑箱：1只 ■ 計(jì)算機(jī)：用戶自配或選配 ■ USB藍(lán)牙適配器：1個(gè) ■ 電源適配器：1個(gè) ■ CPR安裝操作軟件：1套 ■ 復(fù)蘇操作墊：1條 ■ 一次性呼吸面膜(50張/盒)：1盒 ■ 可換肺囊裝置：4套 ■ 可換面皮：1張 ■ AED模擬除顫儀：1臺(tái) ■ 操作指南光盤：1張 ■ 急救手冊(cè)：1本 ■ 說明書：1冊(cè) ■ 保修卡合格證：1張