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本發明提出了一種影響精子功能的唾液酸酶檢測方法。該方法是一種新的評估精子質量與功能的實驗室檢測方法，可為臨床原因不明的男性不育患者提供檢測及臨床咨詢。首次報道精子唾液酸酶的表達與受孕能力的影響（7年原創研究歷史），國際與國內領先地位。已新近申請4項中國相關專利和2項國際專利協定（ PCT）。

本項目來源于國家863計劃項目成果，核心技術已獲得國家發明專利。復合酶皮膠原處理劑系列產品有A-G7個系列、12個品種，這些酶制劑可以分別用于以下不同的用途：（1）豬皮的臀部處理（復合酶皮膠原處理劑A和復合酶皮膠原處理劑B）；（2）牛皮、山羊皮的頸紋處理（復合酶皮膠原處理劑C）；（3）豬皮、山羊皮全皮脫毛處理（復合酶皮膠原處理劑D），這種脫毛完全不同于文件1的有溫有浴酶脫毛，它是通過涂刷在皮的肉面進行脫毛的；（4）水解動物皮提取膠原（復合酶皮膠原處理劑E）；（5）豬皮、牛皮以及羊皮的浸酸軟化和藍坯革處理（復合酶皮膠原處理劑F）；（6）豬、牛、羊皮的軟化處理（復合酶皮膠原處理劑G）。經批量生產并應用結果表明，本項目系列產品，綜合性能優于或接近國內外同類產品，技術成熟。

由于基于酶抑制法的農藥快速 檢驗中所使用的動物來源的酣酶普遍存在著提取成本高，活 性不穩定， 不易于保存的間題。本團隊從蕓豆中篩選并純化出一種植物酣酶。通過底

性能特點： 1、微機控制，觸摸面板，LCD顯示。 2、采用交流變頻電機。 3、可直接設定轉速，自動計算RCF值。可直接設定RCF值，自動轉換成轉速。 4、具有10檔升降速。 5、運行中可修改參數，運行參數自動記憶。 6、具有10種自定義程序存儲功能。 7、具有軟剎車功能。 8、具有轉子號識別功能。 9、具有超速、不平衡和門蓋安全保護功能，并在顯示窗口顯示故障信息和聲音報警。

本發明涉及基因工程領域，具體地，本發明涉及一種豇豆胰蛋白酶抑制劑基因、及其應用、大量制備豇豆胰蛋白酶抑制劑的方法。如上所述本發明的發明人首先利用pcr反應從豇豆基因組dna中直接獲得cpti基因(cpti基因不含有內含子)，然后優化改造所述cpti序列，改造后的序列在大腸桿菌中的表達量和表達比活性都有顯著改進。

項目成果/簡介:本發明涉及基因工程領域，具體地，本發明涉及一種豇豆胰蛋白酶抑制劑基因、及其應用、大量制備豇豆胰蛋白酶抑制劑的方法。如上所述本發明的發明人首先利用pcr反應從豇豆基因組dna中直接獲得cpti基因(cpti基因不含有內含子)，然后優化改造所述cpti序列，改造后的序列在大腸桿菌中的表達量和表達比活性都有顯著改進。

中試階段/n該成果發現特定脂肪酰胺在緩解骨質疏松和神經保護方面具有顯著 功效，并對其作用機制進行了深入研究。在此基礎上，以含特定脂肪酰 胺的藥食兩用植物為主要原料，針對老年人群的健康需求，設計開發了 具有增加骨密度及抗疲勞、抗抑郁和改善記憶能力功能的保健食品，擁 如下系列獨創性的核心技術：1. 闡明了特定脂肪酰胺的生理功效及其作 用機制。2. 創建了植物源的特定脂肪酰胺的單體制備及其含量檢測技 術。該項目在國內率先建立了系列脂肪酰胺單體制備技術及其含量檢測 技術。3. 含特定脂肪酰胺的植物提取物制備

本發明提供聚乙二醇修飾的殼寡糖脂肪酸嫁接物，稱取殼寡糖脂肪酸嫁接物和端醛基化聚乙二醇，加入蒸餾水超聲溶解，攪拌，透析，透析液冷凍干燥，得目的物。本發明的嫁接物具有在水性介質中通過自聚集形成膠團的特性，可顯著減少殼寡糖脂肪酸嫁接物膠團在巨噬細胞中的攝取，并且隨著聚乙二醇修飾比例的增加，膠團在巨噬細胞中的攝取逐漸減少。研究表明膠團對肝癌細胞HepG2和永生化正常肝細胞BRL-3A的攝取沒有顯著影響，細胞毒性作用可以與負載絲裂霉素C的殼寡糖脂肪酸嫁接物膠團保持在同一水平，與游離絲裂霉素C相比，藥效提高了14倍左右，可長循環性載體在制備抗腫瘤藥物中的應用。本發明的結構通式為： 。

常見的納米酶大多數是金屬化合物納米顆粒，其催化活性主要是來自在納米顆粒表面的金屬離子。在自然界中，生物酶的特征表明活性位點和支持、穩定活性位點的網絡環境對于高催化效率同樣重要。通過調整活性位點的成分和環境可以實現高的活性和選擇性。水凝膠是一類具有良好生物相容性的三維親水網絡材料，其結構可以有效地保護酶分子活性中心，同時提供更好的底物遷移微環境，從而實現有效的催化作用，載酶水凝膠材料已成為生物學研究中的熱點。納米凝膠為水凝膠的納米粒子，具有類似于宏觀水凝膠材料的親水網絡及類似流體的傳輸特性，其納米的尺寸可以作為進一步體內生物應用的理想載體。在受限的納米空間中實現修飾或組裝以獲得雜化納米凝膠仍然存在挑戰。應對這一挑戰，同濟大學化學科學與工程學院王啟剛團隊從仿生的角度出發，設計了一種酶催化的原子轉移自由基聚合（ATRPase）和金屬配位交聯方法成功制備出納米人工多酶凝膠體系。該體系具有模擬超氧化物歧化酶（SOD-like）和過氧化物酶（POD-like）特性，可以實現腫瘤微環境級聯催化的響應成像。日前，相關研究成果以“Multienzyme‐Mimic Nanogels Synthesized by Biocatalytic ATRP and Metal Coordination for Bioresponsive Fluorescence Imaging”為題，發表在國際著名學術期刊 Angewandte Chemie International Edition （《德國應用化學》） 上。同濟大學化學科學與工程學院為該文的唯一通訊作者單位，碩士生齊美園為第一作者，王霞副教授和王啟剛教授為共同通訊作者。 圖1.（a）人工多酶凝膠體系的ATRPase及配位交聯制備流程（b）模擬SOD和POD級聯酶催化的腫瘤微環境響應的熒光成像機制。研究人員首先在納米粒子表面修飾酶催化的原子轉移自由基聚合的引發劑(-Br)，以具有良好生物相容性的生物酶為催化劑，修飾有雙鍵的賴氨酸（N-acryloyl-L-lysine）為聚合單體，在納米粒子周圍聚合制備得到聚賴氨酸高分子刷，最后通過亞鐵配位交聯，從而構建出具有多酶活性的人工多酶凝膠體系（如圖1所示）。凝膠體系中高分散的Fe離子一方面作為凝膠網絡的交聯劑，同時作為模擬酶的活性中心。通過模擬SOD和POD酶，先將腫瘤部位高水平的O 2 ?? 催化轉化為H 2 O 2 ，進一步基于腫瘤部位提升的H 2 O 2 通過級聯酶催化反應實現腫瘤微環境響應的安全、高效的腫瘤成像。該人工多酶凝膠體系類似自然的過氧化物酶催化機制不產生羥基自由基，具有低毒性和高生物安全性。同時，ATRPase方法和金屬配位交聯技術可進一步實現多種納米材料體系的制備，用于藥物輸送和其他生物醫學應用。該研究成果得到了國家自然科學基金、國家重點研發計劃等經費支持以及中國科學院強磁場科學中心的技術支持。王啟剛教授團隊多年來一直致力于高分子凝膠固定酶技術及其生物診療應用，近5年累計以通訊作者在 Adv.Mater. ,  Nat. Commun. ,  Angew. Chem. Inter. Ed. 等期刊發表SCI論文50多篇。文獻鏈接：https://www.onlinelibrary.wiley.com/doi/abs/10.1002/anie.202002331  PDF：anie_202002331.pdf課題組網站：https://qgwang.tongji.edu.cn/

磷脂酶 D 是一種用于磷脂改性的工業化生產用酶，近年來研究較多且效果比較明顯的是通過微生物發酵的方法獲得磷脂酶 D。磷脂酶 D 主要用于兩個方面：一是從卵磷脂出發，通過磷酸基轉移反應，制備含量較少的磷脂化合物，如磷脂酰絲氨酸（PS）、磷脂酰肌醇（PI）等；二是通過轉移反應合成新的磷脂衍生物，用在藥物學領域。磷脂酰絲氨酸是磷脂中的一種，天然含量稀少，但它是大腦中主要的酸性磷脂，能控制和調節細胞膜關鍵蛋白的功能狀態，提高腦細胞的活力，改善大腦功能、修復大腦損傷，成為“腦專一性營養物質”。本項目通過菌種篩選獲得一株高產磷脂酶 D 的肉桂鏈霉菌菌株。通過發酵優化，發酵酶活可達到 10U/mL 以上，可用于 PS、PI 的生產。