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項(xiàng)目研發(fā)背景及意義 根據(jù)中國(guó)人口協(xié)會(huì)、國(guó)家衛(wèi)健委發(fā)布的數(shù)據(jù)顯示，中國(guó)育齡夫婦的不孕不育率近年來(lái)已高達(dá)12%-15%，患者人數(shù)超過(guò)5000萬(wàn)。其中，女性因素占比50%，男性因素占比40%，夫婦雙方共同原因占比10%。隨著環(huán)境污染、生育年齡推遲、生活壓力等原因，不孕不育夫婦數(shù)量還在不斷增加。 受中國(guó)傳統(tǒng)觀念影響，現(xiàn)階段不孕不育檢查主要以女性檢測(cè)為主，男性檢測(cè)指標(biāo)只有精液常規(guī)等基本指標(biāo)。但研究表明，在男性不育人群中，仍有15%的患者精液常規(guī)檢測(cè)結(jié)果正常。精液常規(guī)分析僅能反映48%男性的生育能力，并不能很好地預(yù)測(cè)精子的受精能力和妊娠結(jié)局，因此臨床迫切需要引入一些新的檢測(cè)指標(biāo)來(lái)正確評(píng)估精子功能，更準(zhǔn)確得預(yù)測(cè)精子的受精能力和妊娠結(jié)局。 已有的研究結(jié)果表明，精子受精過(guò)程中最為重要的三個(gè)功能指標(biāo)能更加全面地反映男性生育力，包括：精子持續(xù)運(yùn)動(dòng)潛能（線粒體功能）、精子穿過(guò)透明帶的能力（頂體功能）和受精后胚胎發(fā)育潛能（精子DNA碎片）： 1.精子線粒體為精子運(yùn)動(dòng)提供能量，線粒體功能異常會(huì)直接導(dǎo)致精子持續(xù)運(yùn)動(dòng)能力下降，進(jìn)而影響精子穿越子宮、到達(dá)輸卵管與卵子結(jié)合； 2.精子頂體協(xié)助精子穿過(guò)透明帶，頂體功能的正常與否直接決定精子的授精能力； 3.精子提供了一半的遺傳物質(zhì)（DNA），其完整與否可影響到受精卵原核的形成、受精卵卵裂能力、早期胚胎著床能力、后續(xù)胚胎的正常發(fā)育潛力及子代的健康。 上述指標(biāo)異常，臨床上可導(dǎo)致不育、反復(fù)流產(chǎn)和助孕治療成功率低等病癥。除此之外，近年來(lái)也出現(xiàn)了一些新的精液質(zhì)量評(píng)價(jià)指標(biāo)，成為關(guān)注的熱點(diǎn)，包括：精子活性氧水平、精子質(zhì)膜完整性： 1.精子細(xì)胞內(nèi)的活性氧水平對(duì)精子核DNA的完整性、精子線粒體功能等均有影響，間接影響著精子細(xì)胞的損傷程度、精液質(zhì)量、受精能力以及男性生育力； 2.精子質(zhì)膜的完整性可以很好地反映精子的存活率，活精子是完成受精過(guò)程的前提。 上述指標(biāo)異常，是導(dǎo)致精液質(zhì)量下降、男性生育力降低的重要原因。因此，精液檢測(cè)指標(biāo)的增加有助于臨床更全面地評(píng)價(jià)男性精液質(zhì)量、預(yù)測(cè)男性生育力，并提出適合的治療方案或輔助生殖方案。   項(xiàng)目?jī)?nèi)容與創(chuàng)新性 在復(fù)旦大學(xué)云鋒基金的支持下，復(fù)旦大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院呂旭楠與青島復(fù)諾生物醫(yī)療有限公司合作研發(fā)了精子DNA碎片、精子誘發(fā)頂體反應(yīng)、精子線粒體膜電位、精子活性氧類(lèi)物質(zhì)（包括過(guò)氧化物和超氧化物）、精子質(zhì)膜通透性等一系列用于檢測(cè)男性生育力評(píng)價(jià)新指標(biāo)的體外診斷試劑，基于流式細(xì)胞術(shù)的檢測(cè)方法，擁有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)，實(shí)現(xiàn)了臨床應(yīng)用所需的穩(wěn)定性、便捷性、準(zhǔn)確性和高效性。 本項(xiàng)目在整體實(shí)施過(guò)程中實(shí)現(xiàn)了以下創(chuàng)新： ① 計(jì)算機(jī)學(xué)科創(chuàng)新。本項(xiàng)目實(shí)現(xiàn)了三指標(biāo)均能匹配專(zhuān)用的數(shù)據(jù)分析軟件，經(jīng)過(guò)近千例大樣本量的算法設(shè)計(jì)和AI自我學(xué)習(xí)校準(zhǔn)，實(shí)現(xiàn)了一鍵化結(jié)果分析和報(bào)告管理。不再依賴(lài)傳統(tǒng)的肉眼辨別和手動(dòng)框圖計(jì)算，減少了人為誤差，提升了結(jié)果的準(zhǔn)確度和重復(fù)性。本項(xiàng)目軟件均已取得軟件著作權(quán)證書(shū)，結(jié)果圖示展示如下： ② 生物技術(shù)學(xué)科創(chuàng)新。本項(xiàng)目?jī)?yōu)化了染料選擇和分組設(shè)計(jì)，其中頂體指標(biāo)采用獨(dú)特的雙染法設(shè)計(jì)，規(guī)避了過(guò)去需要新鮮樣本、且樣本需要優(yōu)選的冗雜過(guò)程，更符合臨床和實(shí)驗(yàn)室開(kāi)展的實(shí)際需求。本項(xiàng)目方法的創(chuàng)新使得原本單項(xiàng)目的檢測(cè)時(shí)間從3小時(shí)縮短至15分鐘，三項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)檢時(shí)間20分鐘，其中手工操作僅需5分鐘，在國(guó)際上處于領(lǐng)先水平。這一突破從根本上解決了實(shí)驗(yàn)室因原技術(shù)手段耗時(shí)長(zhǎng)、費(fèi)人工、操作復(fù)雜而難以開(kāi)展的技術(shù)問(wèn)題，造成臨床報(bào)告周期長(zhǎng)、受檢者取報(bào)告不便的難題。該項(xiàng)技術(shù)創(chuàng)新目前獲得發(fā)明專(zhuān)利授權(quán)。 ③ 生物技術(shù)學(xué)科創(chuàng)新。本項(xiàng)目完全采用流式細(xì)胞儀的方法進(jìn)行檢測(cè)，替代了傳統(tǒng)的熒光顯微鏡法，單樣本檢測(cè)覆蓋的細(xì)胞數(shù)量多（約5000個(gè)），降低了系統(tǒng)誤差，提高了準(zhǔn)確度，提高了自動(dòng)化程度和可重復(fù)性。   項(xiàng)目進(jìn)展與取得成效 本項(xiàng)目目前已完成科研轉(zhuǎn)化，取得醫(yī)療器械監(jiān)督管理部門(mén)的審批，獲得生產(chǎn)許可，具備臨床合規(guī)銷(xiāo)售的資格。市場(chǎng)推廣方面，除選擇原有的醫(yī)院生殖醫(yī)學(xué)中心作為合作伙伴外，還發(fā)起了與精子庫(kù)的聯(lián)合研究。現(xiàn)階段，本項(xiàng)目已取得以下成績(jī)： 1.臨床方面：目前，本項(xiàng)目已在浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬邵逸夫醫(yī)院、華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬同濟(jì)醫(yī)院、南京鼓樓醫(yī)院等多家三級(jí)及以上醫(yī)院開(kāi)展合作。 2.精子庫(kù)方面：本項(xiàng)目單位已與國(guó)家衛(wèi)健委出生缺陷與生殖健康重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室建成生殖健康聯(lián)合實(shí)驗(yàn)室，共同申報(bào)國(guó)家十四五計(jì)劃生殖健康領(lǐng)域重點(diǎn)項(xiàng)目，擬對(duì)精子庫(kù)精子進(jìn)行更真實(shí)全面的篩選和評(píng)估，預(yù)計(jì)將為精子庫(kù)精子的受孕成功率提升十個(gè)百分點(diǎn)，致力于為適齡不孕不育人群解決生育難題，為可生育人群實(shí)現(xiàn)優(yōu)生優(yōu)育。

鑒于COVID-19是一種新的傳染病，科學(xué)家仍然對(duì)此知之甚少。目前，COVID-19缺乏有效的治療藥物。迄今為止，尚未完成和報(bào)告任何臨床干預(yù)試驗(yàn)。由于治療和預(yù)防疾病的緊急情況，有必要研究和開(kāi)發(fā)有效的COVID-19干預(yù)方法以促進(jìn)疾病控制。自COVID-19爆發(fā)以來(lái)，中國(guó)許多研究人員立即開(kāi)展了臨床研究計(jì)劃，旨在解決COVID-19的治療，預(yù)防和診斷問(wèn)題。但是，到目前為止，仍然缺乏系統(tǒng)的報(bào)告來(lái)分析注冊(cè)臨床試驗(yàn)的特征和存在的問(wèn)題。因此，該研究對(duì)COVID-19的臨床試驗(yàn)進(jìn)行了首次系統(tǒng)評(píng)述，以便為控制COVID-19提供證據(jù)。  各地區(qū)注冊(cè)臨床試驗(yàn)的發(fā)起人地址 該研究檢索了中國(guó)臨床注冊(cè)中心和ClinicalTrials.gov的數(shù)據(jù)庫(kù)，收集已注冊(cè)的COVID-19臨床試驗(yàn)。檢索起始日期為2020年2月9日。總共獲得了75項(xiàng)COVID-19注冊(cè)的臨床試驗(yàn)（63項(xiàng)干預(yù)性研究和12項(xiàng)觀察性研究）。97.3％的臨床試驗(yàn)是由中國(guó)組織發(fā)起的。只有11個(gè)試驗(yàn)開(kāi)始招募患者，所有注冊(cè)的臨床試驗(yàn)尚未完成。大多數(shù)試驗(yàn)是早期的臨床探索性試驗(yàn)或處于試驗(yàn)前階段（只有2項(xiàng)Remdesivir處于Ⅲ期試驗(yàn)），并且招募的樣本量很小。主要干預(yù)手段包括中藥治療，西藥治療和中西醫(yī)結(jié)合治療。受試者主要是非嚴(yán)重的成年患者（≥18歲），主要結(jié)果是臨床觀察和檢查。大多數(shù)試驗(yàn)的持續(xù)時(shí)間超過(guò)5個(gè)月，干預(yù)研究的中位數(shù)為180 天，觀察期的中位數(shù)為334 天。總體而言，干預(yù)注冊(cè)試驗(yàn)和觀察試驗(yàn)的方法學(xué)質(zhì)量均很低。總而言之，正在或?qū)⒃谥袊?guó)進(jìn)行使用中藥和西藥進(jìn)行的COVID-19的無(wú)序和深入的臨床試驗(yàn)。但是，由于質(zhì)量差，樣本量小且完成時(shí)間長(zhǎng)，將在未來(lái)相當(dāng)長(zhǎng)的一段時(shí)間內(nèi)無(wú)法獲得有關(guān)COVID-19治療的可靠，高質(zhì)量的臨床證據(jù)。在中國(guó)進(jìn)行COVID-19的臨床試驗(yàn)時(shí)，值得提倡和建議提高研究設(shè)計(jì)的質(zhì)量，對(duì)有前景的藥物進(jìn)行優(yōu)先安排以及使用不同的設(shè)計(jì)和統(tǒng)計(jì)方法。

南方科技大學(xué)與深圳國(guó)家感染性疾病臨床醫(yī)學(xué)研究中心/南方科技大學(xué)第二附屬醫(yī)院（深圳市第三人民醫(yī)院）等聯(lián)合，從臨床新冠肺炎病例獲取生物樣本，首次使用冷凍電子顯微鏡觀察到了新冠病毒經(jīng)滅活后的真實(shí)形貌，為新冠病毒的識(shí)別、鑒定和臨床相關(guān)研究提供重要的超微影像基礎(chǔ)。該成果于當(dāng)?shù)貢r(shí)間2020年3月5日發(fā)布在生物領(lǐng)域最大的預(yù)印本發(fā)行服務(wù)BioRxiv上。自從2019年底新冠肺炎疫情爆發(fā)以來(lái)，南方科技大學(xué)冷凍電鏡中心與深圳國(guó)家感染性疾病臨床醫(yī)學(xué)研究中心/南方科技大學(xué)第二附屬醫(yī)院（深圳市第三人民醫(yī)院）等成立聯(lián)合研究團(tuán)隊(duì)，啟動(dòng)對(duì)新冠病毒感染肺炎以及新冠病毒分離、培養(yǎng)、鑒定及結(jié)構(gòu)解析等系統(tǒng)性研究分析。聯(lián)合研究團(tuán)隊(duì)依托南方科技大學(xué)第二附屬醫(yī)院（深圳市第三人民醫(yī)院）生物安全I(xiàn)II級(jí)實(shí)驗(yàn)室條件，在2020年1月27日從1名新冠肺炎患者肺泡灌洗液中分離出病毒株，并迅速完成基因組測(cè)序和鑒定，及時(shí)向全球流感信息共享平臺(tái)（GISAID注冊(cè)編號(hào)：EPI_ISL_406594）注冊(cè)共享信息，把其命名為“BetaCoV/Shenzhen/SZTH-003/2020”的新冠毒株。隨后進(jìn)一步完善了實(shí)驗(yàn)室病毒擴(kuò)增、純化及滅活技術(shù)，并綜合應(yīng)用間接免疫熒光法（IFA）、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）、和基因組序列與譜系分析多種方案核實(shí)和確認(rèn)滅活的新冠病毒。隨后南方科技大學(xué)冷凍電子顯微鏡中心專(zhuān)家，利用冷凍電子顯微鏡分析技術(shù)，不僅首次觀察到了真實(shí)的新冠病毒經(jīng)滅活后的形貌，并且捕捉到了該病毒侵染宿主細(xì)胞中的一個(gè)重要中間狀態(tài)。此時(shí)病毒正處于識(shí)別和附著宿主細(xì)胞后，準(zhǔn)備與細(xì)胞發(fā)生融合的時(shí)期。經(jīng)國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)檢索，這是新冠肺炎疫情爆發(fā)以來(lái)，科研工作者首次在冷凍電子顯微鏡下觀察到新冠病毒全病毒的真實(shí)形貌。冷凍電子顯微鏡避免了常溫電子顯微鏡對(duì)生物樣品的脫水、染色等破壞作用，最大限度地保持了生物樣品生理狀態(tài)下的真實(shí)形貌。聯(lián)合研究團(tuán)隊(duì)現(xiàn)正在進(jìn)一步揭示新冠病毒超微結(jié)構(gòu)、病毒侵染人類(lèi)宿主細(xì)胞的特性、與新冠肺炎臨床預(yù)后關(guān)系。在深圳市的大力支持下，聯(lián)合研究團(tuán)隊(duì)正在打造高等級(jí)生物安全臨床冷凍電子顯微鏡研究平臺(tái)，全力推進(jìn)新冠病毒以及其他致命性病毒的超微結(jié)構(gòu)生物學(xué)研究，為傳染病病原鑒定、公共衛(wèi)生突發(fā)事件防控和潛在的抗體、疫苗和新藥研發(fā)提供堅(jiān)實(shí)的科學(xué)基礎(chǔ)。

新型冠狀病毒（SARS-CoV-2）感染對(duì)孕婦造成的后果尚不確定，至今沒(méi)有證據(jù)表明會(huì)對(duì)母親和嬰兒產(chǎn)生嚴(yán)重的后果。但是，嚴(yán)重急性呼吸綜合征（SARS）冠狀病毒和中東呼吸綜合征（MERS）冠狀病毒可能導(dǎo)致不良的妊娠結(jié)局。近期寨卡病毒的防治經(jīng)驗(yàn)也表明，當(dāng)新的病原體出現(xiàn)時(shí)，醫(yī)療界應(yīng)做好最壞的準(zhǔn)備。因此，迫切需要對(duì)面臨SARS-CoV-2感染風(fēng)險(xiǎn)的孕婦提出臨床管理規(guī)范。來(lái)自瑞士、中國(guó)、美國(guó)和法國(guó)的專(zhuān)家聯(lián)合制定的診療規(guī)范可協(xié)助一線醫(yī)務(wù)人員進(jìn)行臨床管理，本規(guī)范于2020年3月3日在線發(fā)表于國(guó)際傳染病學(xué)頂尖期刊《柳葉刀·傳染病》。            引起嚴(yán)重急性呼吸綜合征（SARS）和中東呼吸綜合征（MERS）的冠狀病毒可導(dǎo)致嚴(yán)重的不良妊娠結(jié)局，例如流產(chǎn)，早產(chǎn)，子宮內(nèi)生長(zhǎng)受限和產(chǎn)婦死亡。病毒的垂直傳播尚未在2019年新型冠狀病毒病（COVID-19）中發(fā)現(xiàn)，但懷疑其中1例是圍產(chǎn)期傳播。妊娠期間感染SARS-CoV-2的后果尚不確定，到目前為止，尚無(wú)證據(jù)表明母嬰嚴(yán)重結(jié)局。然而，應(yīng)該考慮這種可能性。寨卡病毒的最新經(jīng)驗(yàn)表明，當(dāng)出現(xiàn)新病原體時(shí)，醫(yī)療界應(yīng)為最壞的情況做好準(zhǔn)備。因此，對(duì)有SARSCoV-2風(fēng)險(xiǎn)的孕婦的管理建議迫切需要感染。為此，該蘭州大學(xué)文章提出了針對(duì)醫(yī)療服務(wù)提供者的詳細(xì)管理方法。      在準(zhǔn)則中，我們建議在過(guò)去14天內(nèi)曾在受SARS-CoV-2感染的國(guó)家中旅行過(guò)或與確診SARS-CoV-2感染的患者密切接觸的任何孕婦均應(yīng)接受 SARS-CoV-2核酸擴(kuò)增試驗(yàn)，即使無(wú)癥狀。實(shí)驗(yàn)室確認(rèn)無(wú)癥狀的SARS-CoV-2感染孕婦應(yīng)在家中自我監(jiān)測(cè)COVID-19的臨床特征至少14天。 由于宮內(nèi)生長(zhǎng)受限的潛在風(fēng)險(xiǎn)，應(yīng)每?jī)蓚€(gè)月用胎兒生長(zhǎng)超聲檢查和多普勒評(píng)估對(duì)這些患者。患有COVID-19肺炎的孕婦應(yīng)由三級(jí)護(hù)理中心的多學(xué)科團(tuán)隊(duì)進(jìn)行管理。當(dāng)符合敗血癥相關(guān)的器官衰竭評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，應(yīng)將患者轉(zhuǎn)移到重癥監(jiān)護(hù)病房。對(duì)于已確診感染的孕婦，分娩時(shí)機(jī)的選擇應(yīng)根據(jù)妊娠周以及母體，胎兒和分娩條件而定。 只要有可能，應(yīng)主張通過(guò)引產(chǎn)進(jìn)行陰道分娩，以避免患者不必要的手術(shù)并發(fā)癥。敗血性休克，急性器官衰竭或胎兒窘迫應(yīng)促使緊急剖宮產(chǎn)。應(yīng)對(duì)SARS-CoV-2陽(yáng)性的母親的新生兒隔離至少14天，或者直到病毒清除為止，在此期間，不建議直接母乳喂養(yǎng)。這些建議應(yīng)適應(yīng)當(dāng)?shù)氐男l(wèi)生保健機(jī)構(gòu)，以及SARS-CoV-2和COVID-19的任何進(jìn)一步更新。

該研究首次鑒定到定位于線粒體的dsRNA受體ZNFX1，發(fā)現(xiàn)其通過(guò)與線粒體上的接頭分子MAVS相互作用，在病毒感染的早期誘導(dǎo)I型干擾素（type I IFN）等ISGs的產(chǎn)生，從而正調(diào)控RIG-I介導(dǎo)的抗病毒免疫應(yīng)答。該研究不僅為抗病毒免疫復(fù)雜性的理解提供了新的見(jiàn)解，也為病毒感染性疾病的診斷和治療提供全新的分子靶點(diǎn)。另外，由于ZNFX1屬于RNA解旋酶SF1家族的分子，該研究有望開(kāi)啟對(duì)SF1家族分子天然免疫功能的全面探索。? 在此基礎(chǔ)上，課題組進(jìn)一步對(duì)IVT-SAPAS的測(cè)序數(shù)據(jù)進(jìn)行深度挖掘，并利用siRNA篩選了數(shù)十個(gè)在病毒感染后發(fā)生表達(dá)量顯著變化的基因，發(fā)現(xiàn)RNA解旋酶SF1家族成員ZNFX1具有顯著抑制RNA病毒復(fù)制的功能。進(jìn)一步功能分析表明，ZNFX1是一個(gè)干擾素誘導(dǎo)基因（interferon stimulated gene, ISG），定位于線粒體外膜上。病毒感染后，ZNFX1通過(guò)ARM和P-loop結(jié)構(gòu)域結(jié)合病毒的dsRNA，并與定于線粒體的接頭分子MAVS相互作用，激活I(lǐng)型干擾素信號(hào)通路，發(fā)揮抑制RNA病毒復(fù)制的功能。由于在靜息狀態(tài)下，ZNFX1具有較高本底蛋白表達(dá)，提示ZNFX1在RNA病毒感染早期階段，即可通過(guò)誘導(dǎo)IFNs和ISGs表達(dá)形成對(duì)RLRs信號(hào)通路的正反饋調(diào)節(jié)。       值得一提的是，徐安龍教授課題組本年度還通過(guò)文昌魚(yú)免疫學(xué)研究，發(fā)現(xiàn)了另一個(gè)進(jìn)化上高度保守的dsRNA識(shí)別受體DDX23。通過(guò)回溯到哺乳動(dòng)物中開(kāi)展比較免疫學(xué)研究，發(fā)現(xiàn)DDX23主要定位于細(xì)胞核內(nèi)。在病毒感染早期，DDX23可從細(xì)胞核轉(zhuǎn)位到細(xì)胞質(zhì)，通過(guò)識(shí)別病毒來(lái)源的dsRNA并激活type I IFN等ISGs的表達(dá)，正反饋調(diào)節(jié)RIG-I介導(dǎo)的抗病毒信號(hào)通路。

2020年2月7日，首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京安貞醫(yī)院朱光發(fā)及解放軍總醫(yī)院解立新共同在國(guó)際頂級(jí)醫(yī)學(xué)期刊JAMA 在線發(fā)表題為“Epidemiologic and Clinical Characteristics of Novel Coronavirus Infections Involving 13 Patients Outside Wuhan, China”的研究，該研究報(bào)告了北京醫(yī)院收治的13例確診為2019-nCoV感染的患者的早期臨床特征。 在該研究中，患者的中位年齡為34歲。2019年nCoV流行后（平均住院時(shí)間為2.5天），有12名患者到了武漢，一名患者與武漢沒(méi)有任何已知的接觸。十二名患者報(bào)告住院前發(fā)燒（平均1.6天）。癥狀包括咳嗽（46.3％），上呼吸道充血（61.5％），肌痛（23.1％）和頭痛（23.1％）。4名患者進(jìn)行了胸部X光片檢查，而9名進(jìn)行了計(jì)算機(jī)斷層掃描。在6例患者中，在右肺或雙肺中均觀察到毛玻璃樣混濁。截至2020年2月4日，所有患者均康復(fù)，但仍有12名患者在醫(yī)院被隔離。 該病例系列提供了有關(guān)武漢以外地區(qū)疾病流行病學(xué)的信息。大多數(shù)患者來(lái)訪或與武漢人密切接觸，但有1名患者沒(méi)有，表明北京可能存在主動(dòng)病毒傳播。為防止病毒大規(guī)模傳播到中國(guó)其他城市，將需要進(jìn)行嚴(yán)密監(jiān)視。這些數(shù)據(jù)有助于了解2019-nCoV的早期臨床表現(xiàn)。

中央指導(dǎo)組專(zhuān)家組成員、首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京中醫(yī)醫(yī)院院長(zhǎng)劉清泉團(tuán)隊(duì)與中央指導(dǎo)組專(zhuān)家組成員、中國(guó)工程院院士張伯禮團(tuán)隊(duì)合作完成的《中醫(yī)藥防治新型冠狀病毒感染的肺炎各地診療方案綜合分析》（以下簡(jiǎn)稱(chēng)《診療方案綜合分析》），該研究在線發(fā)表于《中醫(yī)雜志》。作為科技部“新型冠狀病毒感染的肺炎疫情科技應(yīng)對(duì)”應(yīng)急攻關(guān)項(xiàng)目，該項(xiàng)研究全面收集并整理相關(guān)信息, 匯總分析我國(guó)衛(wèi)生管理部門(mén)發(fā)布的系列《新型冠狀病毒感染的肺炎診療方案》(簡(jiǎn)稱(chēng)“國(guó)家《方案》”)及各地區(qū)《方案》，對(duì)新型冠狀病毒感染的肺炎中醫(yī)證候分型、分期以及方藥特點(diǎn)進(jìn)行梳理，總結(jié)規(guī)律，以期為中醫(yī)藥防治此次疫情以及快速應(yīng)對(duì)同類(lèi)疫情。 研究團(tuán)隊(duì)對(duì)治療性方案進(jìn)行了比較分析：國(guó)家《方案》將新型肺炎按照病程進(jìn)展，將治療期分為寒濕郁肺、疫毒閉肺、內(nèi)閉外脫、肺脾氣虛四型。21個(gè)涉及治療的地方《方案》中，對(duì)該疾病的分期分型基本遵循了病情由輕到重，邪氣由表及里的規(guī)律。將新型肺炎分為醫(yī)學(xué)觀察期、治療期的有山西、河北、寧夏、上海、內(nèi)蒙古；按照病情輕重分型的有浙江、陜西、天津、北京、福建、重慶；21個(gè)地區(qū) 《方案》分型均涉及了中醫(yī)證候。  《診療方案綜合分析》通過(guò)梳理分析24個(gè)地區(qū)《方案》，認(rèn)為各地中醫(yī)在新型肺炎的證候分型和傳變規(guī)律上認(rèn)識(shí)是一致的，均在國(guó)家《方案》基礎(chǔ)上，結(jié)合了本地區(qū)氣候、人群特點(diǎn)從不同角度完善了證候分型，提出了具體化的防治措施，為我國(guó)戰(zhàn)勝此次重大疫情給出了科學(xué)權(quán)威的中醫(yī)方案。 該項(xiàng)研究還對(duì)方藥推薦情況進(jìn)行了梳理：治療性地方 《方案》中僅列出藥物組成，而未列出方劑名稱(chēng)的有26處，觀其藥物組成，多為數(shù)個(gè)經(jīng)方合用加減化裁而成，具有明確名稱(chēng)的中藥方劑共40種，中成藥32種。按照應(yīng)用頻次排序，中藥方劑中麻杏石甘湯頻次最高為15次；其次為宣白承氣湯和升降散；中成藥中，安宮牛黃丸頻次最高為15次，其次為血必凈注射劑和連花清瘟膠囊（顆粒）。 通過(guò)分析，研究團(tuán)隊(duì)建議：１.隨著病例的增多，應(yīng)主動(dòng)開(kāi)展臨床證候?qū)W調(diào)查，掌握臨床第一手資料，根據(jù)病患臨床表現(xiàn)，經(jīng)過(guò)專(zhuān)家認(rèn)真分析，進(jìn)一步總結(jié)疫情病癥特點(diǎn)，證候演變規(guī)律，從而完善全國(guó)防治 《方案》；２. 希望各地在全國(guó)《方案》 基礎(chǔ)上，結(jié)合具體情況，因時(shí)、因地制宜，繼續(xù)調(diào)整、優(yōu)化本地區(qū)中醫(yī)藥防治 《方案》；３.在臨床實(shí)踐中注重總結(jié)治療經(jīng)驗(yàn)，觀察病情轉(zhuǎn)變規(guī)律，總結(jié)有效方藥，不斷完善方案，并將經(jīng)驗(yàn)轉(zhuǎn)化為臨床評(píng)價(jià)證據(jù)；４.此次疾病恢復(fù)期，雖然兩次病毒核酸檢測(cè)陰性符合出院標(biāo)準(zhǔn)，但患者還有乏力、干咳、憋悶等癥狀，肺部影像仍有散發(fā)陰影，此時(shí)中醫(yī)辨證多為氣陰兩虛、痰瘀阻絡(luò)，可以采用益氣養(yǎng)陰、通絡(luò)散結(jié)法治之；５.建議在 《方案》制定及實(shí)踐應(yīng)用中，注重防治結(jié)合，充分發(fā)揮中醫(yī) “治未病思想”。在不同階段采取有效措施，未病先防，已病防變，愈后康復(fù)，全程發(fā)揮中醫(yī)藥作用。

01. 成果簡(jiǎn)介 熒光原位雜交（Fluorescence in situ hybridization，F(xiàn)ISH）是一種以熒光標(biāo)記取代同位素標(biāo)記而形成的新的原位雜交方法。其通過(guò)雜交探針序列及其熒光，能提供標(biāo)記位點(diǎn)在細(xì)胞核內(nèi)的空間位置信息，與基于染色質(zhì)構(gòu)象捕獲（Chromatin Conformation Capture，3C）等各種生物技術(shù)（如4C，5C，HiC，ChIA-PET等）互補(bǔ)，成為研究染色質(zhì)結(jié)構(gòu)不可或缺的重要技術(shù)之一。 傳統(tǒng)的熒光原位雜交技術(shù)一般以含有目標(biāo)物種來(lái)源的一段完整基因組片段作為模板，通過(guò)生物酶的作用進(jìn)行片段化，之后進(jìn)行熒光標(biāo)記做出雜交探針，再固定細(xì)胞中，通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)原理對(duì)特定的基因組片段進(jìn)行熒光標(biāo)記并成像，獲得具體的核內(nèi)空間信息。但是，傳統(tǒng)的原位雜交技術(shù)受限于模板本身的特性，具有準(zhǔn)備時(shí)間長(zhǎng)、所需模板量大、基因分辨率低、克隆中含有重復(fù)片段、需要加入物種特異的Cot-1DNA等缺點(diǎn)。尤其是其分辨率低的特點(diǎn)（分辨率在百kb的數(shù)量級(jí)），讓它在應(yīng)用中受到了很大的限制。 本項(xiàng)成果提供了一種新的針對(duì)目標(biāo)核酸靶標(biāo)探針的制備方法（見(jiàn)圖1），該方法比傳統(tǒng)的FISH技術(shù)的分辨率提高了1-2個(gè)數(shù)量級(jí)（見(jiàn)圖2），可應(yīng)用于傳統(tǒng)熒光原位雜交因分辨率不夠而不能探測(cè)、或者被錯(cuò)誤探測(cè)的地方。該成果的具體步驟（見(jiàn)圖1）包括：（1）獲取感興趣的靶DNA序列；（2）使用轉(zhuǎn)座酶將靶DNA序列進(jìn)行片段化的同時(shí)，在片段化的DNA序列兩端加上接頭序列；和（3）利用所述接頭序列，獲取所述片段化的DNA序列，以產(chǎn)生探針。本項(xiàng)成果的技術(shù)優(yōu)勢(shì)在于：快速高效、模板需求量低、基因組分辨率高、且不需要Cot-1DNA。 圖1 探針制備方法的具體步驟。 02.應(yīng)用前景 本項(xiàng)成果是一種快速高效、模板需求量低、基因組分辨率高、且不需要Cot-1DNA的熒光原位雜交方法，可作為現(xiàn)有的傳統(tǒng)熒光原位雜交技術(shù)的可選替代方案。尤其是該方法的分辨率高，比傳統(tǒng)的FISH技術(shù)的分辨率高1-2個(gè)數(shù)量級(jí)（見(jiàn)圖2），因此可應(yīng)用于傳統(tǒng)熒光原位雜交因分辨率不夠而不能探測(cè)、或者被錯(cuò)誤探測(cè)的很多地方。 例如，在基因組的三維結(jié)構(gòu)中，TAD（拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)域）是結(jié)構(gòu)和功能的基本單元。TAD內(nèi)部和TAD之間的增強(qiáng)子和啟動(dòng)子發(fā)生的錯(cuò)誤的相互作用，是一些癌癥發(fā)生的根本原因。而傳統(tǒng)的FISH技術(shù)因?yàn)榉直媛实南拗疲綔y(cè)不到這些錯(cuò)誤的相互作用。因此本項(xiàng)成果在臨床有著廣泛的應(yīng)用，可以用于癌癥及一些其它疾病的極早期檢測(cè)。 圖2  相比于傳統(tǒng)的BAC FISH（圖上方綠條，長(zhǎng)度為152kb），僅用1.170 kb（紅條）長(zhǎng)的TN5探針，就可以得到要標(biāo)記的基因組位點(diǎn)的圖像。 圖中細(xì)胞核（藍(lán)色）中，紅色和綠色的點(diǎn)相互重疊，說(shuō)明Tn5 FISH可以用傳統(tǒng)的BAC FISH進(jìn)行驗(yàn)證。黃色箭頭表示用Tn5 FISH（紅色通道，左上角插入圖）或BAC- FISH（綠色通道，左下角插入圖）進(jìn)行成像。圖中比例尺為5μm。03. 知識(shí)產(chǎn)權(quán) 本項(xiàng)成果已申請(qǐng)1項(xiàng)國(guó)內(nèi)發(fā)明專(zhuān)利，目前正在申請(qǐng)國(guó)際專(zhuān)利。04. 團(tuán)隊(duì)介紹 本項(xiàng)目團(tuán)隊(duì)負(fù)責(zé)人為清華大學(xué)教授、博士生導(dǎo)師，國(guó)家首批千人。團(tuán)隊(duì)的主要研究方向涉及：生物信息學(xué)和基因組三維結(jié)構(gòu)新方法的開(kāi)發(fā)，利用細(xì)胞超分辨率成像、分子成像和生物信息學(xué)的方法進(jìn)行基因組三維結(jié)構(gòu)和系統(tǒng)生物學(xué)的研究選。團(tuán)隊(duì)負(fù)責(zé)人曾多次主持或參與美國(guó)NIH的R01科研項(xiàng)目、中國(guó)國(guó)家自然科學(xué)基金及科技部的科研項(xiàng)目，已發(fā)表高水平學(xué)術(shù)論文200余篇。05. 合作方式 專(zhuān)利許可、合作開(kāi)發(fā)。06. 聯(lián)系方式 郵箱：zhangxinrui@tsinghua.edu.cn

定量系統(tǒng)生物學(xué)是描述生命體的細(xì)胞、組織、器官以及整體水平上結(jié)構(gòu)和功能各異的各種分子（包括基因、蛋白質(zhì)、小分子代謝物等），以及分子在生命體的內(nèi)部之間、與外界環(huán)境之間的相互作用，通過(guò)精準(zhǔn)的分析測(cè)量技術(shù)、結(jié)合計(jì)算生物學(xué)來(lái)定性、定量構(gòu)建生命的數(shù)字化模型，預(yù)測(cè)生理狀態(tài)或者疾病的功能、表型和轉(zhuǎn)化的前沿科學(xué)。生命體的運(yùn)作是在基因調(diào)控下，由許許多多的生化反應(yīng)形成

本實(shí)用新型公開(kāi)一種小型新堆肥化裝置，包括堆肥室、保溫殼和控制器，所述堆肥室設(shè)置在保溫殼內(nèi)部，堆肥室外壁上設(shè)有加熱帶，堆肥室底部有一腔體B，腔體B通過(guò)進(jìn)氣管道與外部連通，所述進(jìn)氣管道位于保溫殼外部一端連接有氣體流量計(jì)和電磁閥，所述保溫殼頂部設(shè)有出氣管道，所述出氣管道位于保溫殼外部一端連接有吸收瓶，所述堆肥室內(nèi)部還設(shè)有溫度傳感器，所述保溫殼包括殼體和殼蓋，所述殼蓋位于殼體頂部，殼蓋內(nèi)表面由中間向邊緣逐漸向下傾斜。本實(shí)用新型結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，使用方便，能同時(shí)監(jiān)測(cè)多種數(shù)據(jù)，并記錄分析，然后通過(guò)反饋控制保證堆肥化裝置維持在最好的條件下運(yùn)行，從而提高堆肥效率，并且減少對(duì)周?chē)h(huán)境的污染。