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試紙條快速檢測(cè)技術(shù)是近年來(lái)逐漸發(fā)展成熟的一項(xiàng)簡(jiǎn)便、快速、檢測(cè)成本低廉的免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)。該技術(shù)以抗體對(duì)抗原的特異性識(shí)別和單向膜層析技術(shù)為基礎(chǔ)。 一、項(xiàng)目分類 關(guān)鍵核心技術(shù)突破 二、成果簡(jiǎn)介 試紙條快速檢測(cè)技術(shù)是近年來(lái)逐漸發(fā)展成熟的一項(xiàng)簡(jiǎn)便、快速、檢測(cè)成本低廉的免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)。該技術(shù)以抗體對(duì)抗原的特異性識(shí)別和單向膜層析技術(shù)為基礎(chǔ)。特異性的抗體結(jié)合納米金標(biāo)記技術(shù)決定了該方法的特異性和靈敏度。由于該技術(shù)擁有特異、靈敏、簡(jiǎn)單、快速、成本低、無(wú)需儀器、肉眼即可判定結(jié)果等優(yōu)點(diǎn)，已經(jīng)被廣泛應(yīng)用在疾病診斷、抗體檢測(cè)、理化分析，微生物檢測(cè)、違禁品及藥物殘留的監(jiān)控等領(lǐng)域。

“NMT界喬布斯”許越先生推薦創(chuàng)新平臺(tái) 中關(guān)村NMT產(chǎn)業(yè)聯(lián)盟推介成員單位創(chuàng)新產(chǎn)品 “全球抗疫，人人有責(zé)” ? 推出背景： 中國(guó)的疫情目前已得到有效抑制，但全球的疫情形勢(shì)依舊嚴(yán)峻。在這種情況下，中國(guó)盡全力向世界各國(guó)分享抗疫的經(jīng)驗(yàn)和成果，這充分顯示出大國(guó)的奉獻(xiàn)與擔(dān)當(dāng)，同時(shí)彰顯了為人類命運(yùn)的共同繁榮而奮斗的精神。 但大家也清醒地認(rèn)識(shí)到，與新冠肺炎的科技斗爭(zhēng)才剛剛拉開序幕，未來(lái)任重道遠(yuǎn)，尤其是在研究技術(shù)及方法的競(jìng)爭(zhēng)上更是世界各國(guó)競(jìng)爭(zhēng)的焦點(diǎn)！ 作為中國(guó)的高新技術(shù)企業(yè)，中關(guān)村NMT聯(lián)盟的會(huì)員單位，旭月（北京）科技有限公司充分響應(yīng)國(guó)家對(duì)于生物安全的政策。在短時(shí)間內(nèi)，利用20多年的技術(shù)積累，為抗擊新型冠狀病毒肺炎隆重推出： 《NMT新冠疫苗及免疫機(jī)理研究系統(tǒng)》系列產(chǎn)品！ ? 應(yīng)對(duì)挑戰(zhàn)： 1）有效性：隨著研究的深入，單細(xì)胞的生理狀態(tài)，以及對(duì)疫苗的生理反應(yīng)，與處于機(jī)體組織器官中的細(xì)胞的差異，已逐漸成為研究中的瓶頸。NMT不僅可以檢測(cè)單細(xì)胞，還可以實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)胞的原位檢測(cè)，以及對(duì)活體組織的在體檢測(cè)，很好地彌補(bǔ)了這一研究手段的空白。 2）安全性：NMT是用于研究活體材料的生理環(huán)境，其所檢測(cè)的Na+、H+、K+、Cl-等與細(xì)胞能量代謝、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞形態(tài)維持等生理過(guò)程直接相關(guān)。 分類及用途： 1）《NMT新冠疫苗及免疫機(jī)理研究系統(tǒng)》（型號(hào)：NMT-VIM-100） 基于底層核心NMT技術(shù)，以及成熟的技術(shù)解決方案，讓科研人員可以馬上投入相關(guān)科研創(chuàng)新工作。 ? 2）《NMT新冠疫苗及免疫機(jī)理研究系統(tǒng)》（型號(hào)：NMT-VIM-200） 基于底層核心NMT技術(shù)，結(jié)合自身科研興趣，以及其它相關(guān)技術(shù)參數(shù)，在我方技術(shù)人員協(xié)助下形成技術(shù)解決方案，讓科研人員建立更具獨(dú)有創(chuàng)新特色的實(shí)驗(yàn)平臺(tái)。 ? 《NMT新冠疫苗及免疫機(jī)理研究系統(tǒng)》（型號(hào)：NMT-VIM-100） 應(yīng)對(duì)挑戰(zhàn)： 1）有效性：隨著研究的深入，單細(xì)胞的生理狀態(tài)，以及對(duì)疫苗的生理反應(yīng)，與處于機(jī)體組織器官中的細(xì)胞的差異，已逐漸成為研究中的瓶頸。NMT不僅可以檢測(cè)單細(xì)胞，還可以實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)胞的原位檢測(cè)，以及對(duì)活體組織的在體檢測(cè)，很好地彌補(bǔ)了這一研究手段的空白。 2）安全性：NMT是用于研究活體材料的生理環(huán)境，其所檢測(cè)的Na+、H+、K+、Cl-等與細(xì)胞能量代謝、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞形態(tài)維持等生理過(guò)程直接相關(guān)。 用途： 基于底層核心NMT技術(shù)，以及成熟的技術(shù)解決方案，讓科研人員可以馬上投入相關(guān)科研創(chuàng)新工作。 ? 參數(shù) 1.基本功能： 1.1針對(duì)新冠疫苗及免疫機(jī)理研究設(shè)計(jì) 1.2活體、原位、非損傷檢測(cè) 1.3可檢測(cè)指標(biāo)：H+、K+、Ca2+、Cl-、O2 2.性能： 2.1自動(dòng)化操作 2.2長(zhǎng)時(shí)間實(shí)時(shí)和動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè) 2.3無(wú)需標(biāo)記 2.4立體3D流速檢測(cè) 3.軟件： 3.1imFluxes智能軟件，可直接檢測(cè)、輸出離子分子的濃度與流速 ? ? 《NMT新冠疫苗及免疫機(jī)理研究系統(tǒng)》（型號(hào)：NMT-VIM-200） 應(yīng)對(duì)挑戰(zhàn)： 1）有效性：隨著研究的深入，單細(xì)胞的生理狀態(tài)，以及對(duì)疫苗的生理反應(yīng)，與處于機(jī)體組織器官中的細(xì)胞的差異，已逐漸成為研究中的瓶頸。NMT不僅可以檢測(cè)單細(xì)胞，還可以實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)胞的原位檢測(cè)，以及對(duì)活體組織的在體檢測(cè)，很好地彌補(bǔ)了這一研究手段的空白。 2）安全性：NMT是用于研究活體材料的生理環(huán)境，其所檢測(cè)的Na+、H+、K+、Cl-等與細(xì)胞能量代謝、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞形態(tài)維持等生理過(guò)程直接相關(guān)。 用途： 基于底層核心NMT技術(shù)，結(jié)合自身科研興趣，以及其它相關(guān)技術(shù)參數(shù)，在我方技術(shù)人員協(xié)助下形成技術(shù)解決方案，讓科研人員建立更具獨(dú)有創(chuàng)新特色的實(shí)驗(yàn)平臺(tái)。 參數(shù) 1.基本功能： 1.1針對(duì)新冠疫苗及免疫機(jī)理研究和研發(fā)設(shè)計(jì) 1.2活體、原位、非損傷檢測(cè) 1.3可檢測(cè)指標(biāo)：H+、K+、Ca2+、Cl-、O2 1.4可實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)和記錄檢測(cè)時(shí)的環(huán)境參數(shù)：溫度、濕度、大氣壓、海拔、經(jīng)緯度 1.5配備新指標(biāo)拓展功能 2.性能： 2.1自動(dòng)化操作 2.2長(zhǎng)時(shí)間實(shí)時(shí)和動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè) 2.3無(wú)需標(biāo)記 2.4立體3D流速檢測(cè) 3.軟件： 3.1imFluxes智能軟件，可直接檢測(cè)、輸出離子分子的濃度與流速，以及檢測(cè)時(shí)的環(huán)境參數(shù)

研發(fā)階段/n本發(fā)明公開了一種將鬼臼毒素轉(zhuǎn)化為鬼臼酸和鬼臼苦素的方法，包括：在微生物銅綠假單胞菌、芽孢桿菌、紅串紅球菌、梭狀芽孢桿菌、北京棒桿菌、枯草桿菌、噬夏孢歐文氏菌或彎曲假單胞菌的發(fā)酵過(guò)程中加入底物鬼臼毒素溶液，進(jìn)行生物轉(zhuǎn)化反應(yīng)，得到含有鬼臼酸和鬼臼苦素的生物轉(zhuǎn)化基質(zhì)。本發(fā)明還公開了一種將鬼臼酸和鬼臼苦素從所得到的生物轉(zhuǎn)化基質(zhì)中分離出來(lái)的方法，包括：將生物轉(zhuǎn)化基質(zhì)用大孔吸附樹脂柱進(jìn)行初分離，并以凝膠柱層析細(xì)分離，分別得到鬼臼苦素和鬼臼酸。本發(fā)明利用微生物轉(zhuǎn)化對(duì)鬼臼毒素結(jié)構(gòu)進(jìn)行修飾，得到鬼臼酸和鬼

研發(fā)階段/n本發(fā)明公開了一種將鬼臼毒素生物轉(zhuǎn)化為4-(2，3，5，6-四甲基吡嗪-1-基)-4′-去甲表鬼臼毒素的方法，包括：(1)、將鬼臼毒素加入到液體發(fā)酵培養(yǎng)基中，然后接種腐殖性土壤菌二級(jí)液體種子進(jìn)行生物轉(zhuǎn)化；(2)、將步驟(1)產(chǎn)物經(jīng)分離純化后加入到液體發(fā)酵培養(yǎng)基中，接種鬼臼類植物內(nèi)生菌二級(jí)液體種子進(jìn)行生物轉(zhuǎn)化；隨后添加川芎嗪繼續(xù)生物轉(zhuǎn)化，收集轉(zhuǎn)化產(chǎn)物，即得。本發(fā)明還公開了從上述產(chǎn)物中分離純化4-(2，3，5，6-四甲基吡嗪-1-基)-4′-去甲表鬼臼毒素及其含量檢測(cè)的方法。本發(fā)明通過(guò)生物轉(zhuǎn)化

本發(fā)明提供了一種痕量?jī)?nèi)毒素的快速檢測(cè)方法，可直接靈敏高通量地檢測(cè)多種樣品中痕量?jī)?nèi)毒素，并提供相應(yīng)的試劑盒，該試劑盒人工抗體的 96 孔酶標(biāo)板、內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)品溶液、兔抗內(nèi)毒素多克隆抗體(一抗)、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的羊抗兔抗體(二抗)和化學(xué)發(fā)光試劑組成。該方法將集特異性樣品預(yù)處理和 ELISA 檢測(cè)于一體，人工抗體耐高溫、酸堿和有機(jī)溶劑，可高效特異性分離和富集樣品中的痕量?jī)?nèi)毒素，ELISA 則可特異快速地檢測(cè)所富集的內(nèi)毒素，結(jié)合高靈敏度的化學(xué)發(fā)光法，有效提高 ELISA 檢測(cè)內(nèi)毒素的靈敏度、準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性

本發(fā)明提供一類4-取代苯胺基表鬼臼毒素衍生物，是指4’-O-去甲基-4-脫氧-4-取代苯胺基表鬼臼毒素衍生物，是利用現(xiàn)有的藥物依托泊苷作為先導(dǎo)化合物，通過(guò)結(jié)構(gòu)改造，合成一系列具有抗腫瘤活性的化合物，初步的體外篩選和體內(nèi)抑瘤實(shí)驗(yàn)表明，這些化合物具有較好的抗腫瘤活性，其中化合物GL3在提高對(duì)腫瘤抑制作用的同時(shí)，其毒性也明顯降低，可制備具有抗腫瘤活性較高、毒性較低、對(duì)多藥耐藥腫瘤有效的抗腫瘤藥物；本發(fā)明的結(jié)構(gòu)通式：。

南京農(nóng)業(yè)大學(xué)資環(huán)學(xué)院沈其榮教授團(tuán)隊(duì)以木霉菌為研究材料，通過(guò)生態(tài)遺傳學(xué)方法，解析了一類表面活性小分子蛋白Hydrophobin（HFB）參與真菌分生孢子傳播，進(jìn)而影響其環(huán)境適應(yīng)性與物種分化的分子機(jī)制， 真菌進(jìn)化生物學(xué)由于化石證據(jù)的缺乏、群體間生活史迥異以及同時(shí)具有無(wú)性和有性生殖現(xiàn)象等問(wèn)題而發(fā)展相對(duì)緩慢；另一方面，也正是因?yàn)檫@些獨(dú)有的特性，真菌具有高度生態(tài)可塑性，因而可作為進(jìn)化生物學(xué)研究的極佳對(duì)象。高等絲狀真菌通過(guò)在分生孢子表面“涂”上一層由表面活性小分子蛋白HFB組成的“疏水涂層”而實(shí)現(xiàn)孢子的風(fēng)媒傳播等功能。研究人員針對(duì)姐妹種木霉T. harzianum(Th)和T. guizhouense(Tg)的高表達(dá)hfb基因（hfb4和hfb10）構(gòu)建了基因敲除突變體庫(kù)，并分別對(duì)突變體進(jìn)行了風(fēng)媒和水媒的傳播模擬試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)不同菌種有各自偏好的傳播方式。研究人員對(duì)突變子進(jìn)行抗逆性、生長(zhǎng)和繁殖能力測(cè)試，發(fā)現(xiàn)HFB4的移除不僅顯著影響真菌的生態(tài)適應(yīng)性（Fitness），且同一HFB對(duì)真菌適應(yīng)性的貢獻(xiàn)力即便在遺傳背景相近的菌株間也差異顯著。基于此，研究人員分別對(duì)兩個(gè)種群的hfb4（及hfb10）進(jìn)行了自然選擇壓力計(jì)算，發(fā)現(xiàn)來(lái)自Th的hfb4受到強(qiáng)正向選擇壓力驅(qū)使。結(jié)合其生理生態(tài)習(xí)性（圖1），研究人員猜測(cè)，Tg可能起源于水生環(huán)境，其孢子為脫離親代生境，需要通過(guò)風(fēng)媒傳播至別處，且在高空中傳播要求其孢子可以耐低溫和UV照射，Tg具有上述特征；而Th則更偏向于利用雨水或昆蟲進(jìn)行傳播，其確切的傳播偏好有待進(jìn)一步研究。在整個(gè)進(jìn)化歷程中，hfb4對(duì)菌株生態(tài)適應(yīng)性的凈貢獻(xiàn)率是物種多個(gè)指標(biāo)或特性進(jìn)化權(quán)衡（compromise）的結(jié)果，例如hfb4的存在可提高Tg孢子的風(fēng)媒傳播能力，但卻會(huì)相應(yīng)“犧牲”掉一些耐低溫特性。 在本研究中，研究人員結(jié)合人工智能（AI）技術(shù)開發(fā)了一套可高通量監(jiān)測(cè)絲狀真菌生長(zhǎng)和繁殖能力的技術(shù)集合——REPAINT。REPAINT技術(shù)不僅擴(kuò)充了真菌環(huán)境適應(yīng)性評(píng)價(jià)體系的指標(biāo)內(nèi)容，使基于純培養(yǎng)方式的數(shù)據(jù)采集實(shí)現(xiàn)高通量智能化和標(biāo)準(zhǔn)化，而且允許針對(duì)不同真菌類群實(shí)行定制化調(diào)整。

真菌屬于“創(chuàng)造系數(shù)”很高的生物資源，可以產(chǎn)生結(jié)構(gòu)多樣、新穎，活性廣泛的次生代謝產(chǎn)物，對(duì)藥物和功能食品的研發(fā)都至關(guān)重要。抗生素類藥物青霉素和先鋒霉素、降血脂類藥物洛伐他汀，以及免疫抑制劑環(huán)孢菌素的發(fā)現(xiàn)，都顯示出真菌資源在藥物研發(fā)中的優(yōu)越性。真菌作為食用、藥用或保健品，在我國(guó)有悠久的歷史。我國(guó)真菌資源豐富多樣，已報(bào)道近1000 種食藥用真菌，已探明藥效的真菌 400 余種，可用于開發(fā)功能食品的真菌也很多。本項(xiàng)目通過(guò)獨(dú)特的真菌混合發(fā)酵技術(shù)，產(chǎn)生新結(jié)構(gòu)的活性產(chǎn)物幾率遠(yuǎn)高于單獨(dú)菌種發(fā)酵，目前已經(jīng)構(gòu)建包含 5000 個(gè)樣品的真菌代謝產(chǎn)物庫(kù)，建立了免疫增強(qiáng)、抗炎和降三高模型，高通量篩選發(fā)現(xiàn)了多個(gè)具有增強(qiáng)調(diào)節(jié)和抗炎組分，具有很好的慢性病干預(yù)應(yīng)用潛力。

真菌疏水蛋白具有自我裝配成膜的性質(zhì)，因此 （1）疏水蛋白可作為蛋白和細(xì)胞固定化的媒介，可用于生物傳 感器和生物芯片，作為引發(fā)層，交聯(lián)上配體或形成融合蛋白，能使特 定分子固定化到特定表面。 （2）它能改變表面的屬性，保護(hù)表面。可用于提高醫(yī)學(xué)器官移 植物生物相容性和防止微生物細(xì)胞粘附；可應(yīng)用于醫(yī)藥行業(yè)中燒傷、 創(chuàng)傷的創(chuàng)面保護(hù)，為臨床病人創(chuàng)面保護(hù)和恢復(fù)提供一種安全無(wú)毒、操 作簡(jiǎn)便、高效低耗的新手段。 （3）作為一種生物表面活性劑，疏水蛋白還可以用于促進(jìn)土壤 中的污染物的降解和應(yīng)用在石油泄漏后回收石油的過(guò)程中。 （4）疏水蛋白具有表面活性，可用于食品對(duì)抗相變能力并形成 穩(wěn)定泡沫，使其在密封食品生產(chǎn)上發(fā)揮重要作用； （5）也可用于日用化妝品生產(chǎn)中，因疏水蛋白可以作為洗潔產(chǎn) 品的成分，根據(jù)其疏水、親水兩相間的轉(zhuǎn)變，可通過(guò)自我裝配而將面 部的油脂等疏水的成分包裹起來(lái)，再用水清洗將其除去，也可以作為 保護(hù)秀發(fā)的天然膜，使發(fā)部維持清潔并保持一定水分；將它運(yùn)用到面 部的美容護(hù)理，由于它的特性，能使皮膚表面形成一層天然生物活性 保護(hù)膜，起到皮膚保濕、免受外界空氣中污濁物的侵害，從而達(dá)到護(hù)膚美容之功效。 （6）疏水蛋白直接包裹藥物以改變藥物溶解性并實(shí)現(xiàn)控、緩釋。 通過(guò)真菌疏水蛋白與難溶于水的藥物混合，可以達(dá)到良好的分散效果， 并延長(zhǎng)了兩種藥物的藥效持續(xù)時(shí)間。 （7）真菌疏水蛋白與其他的功能性蛋白或小肽組成融合蛋白， 同時(shí)發(fā)揮疏水蛋白的穩(wěn)定吸附材料表面的特性和功能性蛋白或小肽 的特異性功能，如在組織工程、抗炎抗菌材料等。 項(xiàng)目特色： 純天然生物制品，無(wú)毒害，無(wú)污染。耐酸堿，抗相變能力強(qiáng)。自 我裝配形成有活性的蛋白膜。具有良好的熱穩(wěn)定性和透氣不透水性。 由于它的特性，使得它具有：（1）自動(dòng)成膜，無(wú)需貼敷，使用便利； （2）透氣性優(yōu)良；(3)純天然無(wú)化學(xué)添加成分，瑞氏木霉已被證明是 安全的菌種；（4）組織相容性好，避免了嚴(yán)重的排異反應(yīng)；（5）耐高 溫（100 攝氏度仍保持活性），易于消毒；（6）穩(wěn)定不降解，便于產(chǎn)品 的長(zhǎng)期保存；（7）用表面活性劑就可以很容易地清洗（8）延展性好， 1 毫克的疏水蛋白在液面就可以展開 1 平方米的薄膜（9）透明，可直 接透過(guò)成膜觀察（10）性價(jià)比高。 市場(chǎng)應(yīng)用前景： 目前國(guó)際上尚未實(shí)現(xiàn)疏水蛋白的工業(yè)化生產(chǎn)，其相關(guān)應(yīng)用產(chǎn)品的 開發(fā)更為滯后。我們?cè)谝褜?shí)現(xiàn)疏水蛋白中試研發(fā)的基礎(chǔ)上，擴(kuò)大發(fā)酵 規(guī)模，進(jìn)行后續(xù)產(chǎn)品的開發(fā)，我們的技術(shù)和工藝現(xiàn)居國(guó)際領(lǐng)先地位， 無(wú)疑會(huì)占有寶貴的先機(jī)。 疏水蛋白產(chǎn)品將作為新一代膜生物活性材料進(jìn)入市場(chǎng)，它的出現(xiàn) 將會(huì)革命性地取代現(xiàn)有化學(xué)產(chǎn)品，這無(wú)疑給人類的健康帶來(lái)了很大的 益處，消除人類在預(yù)防和治療疾病、食品加工、以及醫(yī)學(xué)檢測(cè)、食物保鮮方面為健康做出努力的同時(shí)給自身帶來(lái)的潛在危害，而且價(jià)格更 為低廉。因此，本項(xiàng)目大規(guī)模生產(chǎn)疏水蛋白及其應(yīng)用開發(fā)是有非常廣 闊的市場(chǎng)前景的，并且我們的技術(shù)在國(guó)際和國(guó)內(nèi)市場(chǎng)處于領(lǐng)先地位。 這些產(chǎn)品都將在國(guó)際市場(chǎng)上處于最優(yōu)競(jìng)爭(zhēng)狀態(tài)。

該測(cè)流免疫層析試紙用于檢測(cè)金黃色葡萄球菌， 其原理為通過(guò)射頻諧振器感應(yīng)試紙上被捕獲的金黃色葡萄球菌核酸，實(shí)現(xiàn)細(xì)菌的 定量檢測(cè)。該新型層析試紙由免疫層析功能區(qū)、射頻諧振器和支撐板組成，如上圖所示。 通過(guò)噴蠟打印技術(shù)在紙上形成疏水的區(qū)域和親水微通道，避免滴加液體樣品后通 道外紙張彎曲和變形，從而導(dǎo)致諧振器形狀發(fā)生變化。免疫層析功能區(qū)由樣品墊、 結(jié)合墊、吸收墊和微流道中的測(cè)試線和控制線組成。市場(chǎng)及經(jīng)濟(jì)效益分析： 直接經(jīng)濟(jì)效益：?jiǎn)蝺r(jià)250元，年生產(chǎn)保守估計(jì)1000套，生產(chǎn)成本150元， 預(yù)計(jì)利潤(rùn)100000元。 社會(huì)效益分析：該產(chǎn)品立足于國(guó)產(chǎn)，常用檢測(cè)金黃色葡萄球菌的方法只能在 實(shí)驗(yàn)室或?qū)I(yè)檢測(cè)公司進(jìn)行，檢測(cè)設(shè)備昂貴，速度慢。該產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)簡(jiǎn)單快速的 檢測(cè)，且檢測(cè)場(chǎng)地可在家、荒野等條件受限區(qū)。