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結(jié)核分枝桿菌融合蛋白 Mtb10.4-Hsp16.3 的構(gòu)建.表達(dá)和 純化方法及其應(yīng)用
本發(fā)明選擇結(jié)核桿菌生長(zhǎng)期和休眠期主要的保護(hù)性抗原 Mtb10.4 和 Hsp16.3，構(gòu)建融合蛋白 Mtb10.4-Hsp16.3(MH)。在大腸桿菌中表 達(dá)純化該蛋白，將該蛋白和佐劑混合構(gòu)建亞單位疫苗，分別于 BCG 初免后 12、14 周加強(qiáng)免疫 C57BL/6 小鼠兩次，最后一次免疫 6 周后 檢測(cè)細(xì)胞免疫反應(yīng)，最后一次免疫后 10 周進(jìn)行結(jié)核菌毒株&nb
蘭州大學(xué)
2021-04-14
結(jié)核分枝桿菌融合蛋白 Mtb10.4-Hsp16.3 的構(gòu)建.表達(dá)和 純化方法及其應(yīng)用
本發(fā)明選擇結(jié)核桿菌生長(zhǎng)期和休眠期主要的保護(hù)性抗原 Mtb10.4 和 Hsp16.3，構(gòu)建融合蛋白 Mtb10.4-Hsp16.3(MH)。在大腸桿菌中表 達(dá)純化該蛋白，將該蛋白和佐劑混合構(gòu)建亞單位疫苗，分別于 BCG 初免后 12、14 周加強(qiáng)免疫 C57BL/6 小鼠兩次，最后一次免疫 6 周后 檢測(cè)細(xì)胞免疫反應(yīng)，最后一次免疫后 10 周進(jìn)行結(jié)核菌毒株&nb
蘭州大學(xué)
2021-04-14
以人 FKBP51 蛋白為靶點(diǎn)的先導(dǎo)化合物及篩選方法與應(yīng)用
雄激素受體(androgen receptor，AR)被認(rèn)為在前列腺癌的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移中起到關(guān)鍵作用。因此，雄激素撤除療法(androgendeprivation therapy)成為治療晚期前列腺癌的最常用和有效的方法。但是在治療的兩到三年內(nèi)，大部分晚期前列腺癌就會(huì)發(fā)展成去勢(shì)抵抗性前列腺癌(CRPC)。對(duì)于 CRPC 目前缺乏有效治療手段，成為前列腺癌治療中最為棘手的問(wèn)題。在雄激素撤除環(huán)境下，AR 的再激活存在多種途徑，主要包括病灶部位雄激素的合成、AR 的基因突變、倍增和可變剪切以及 AR 共
蘭州大學(xué)
2021-04-14
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用于腦中風(fēng)治療的一種具有溶栓和腦保護(hù)作用的融合蛋白
腦卒中為腦血管破裂或血栓阻塞血管導(dǎo)致大腦缺血損傷，其治療的藥物非常缺乏，阿替普酶是迄今為止唯一獲得FDA批準(zhǔn)用于缺血性腦卒中的溶栓藥物,易引起再灌注損傷,可延長(zhǎng)其給藥時(shí)間窗和減輕再灌注損傷。但臨床上神經(jīng)保護(hù)劑十分缺乏。本項(xiàng)目為腦中風(fēng)治療的小分子蛋白藥物研究，包括兩個(gè)小分子量蛋白。其一是犬鉤蟲抗凝多肽5（AcAP5），是一種具有強(qiáng)效抗血栓形成（抑制FXa）和溶血栓（抑制TAFIa）兩種功能的蛋白，其中溶栓作用為本團(tuán)隊(duì)發(fā)現(xiàn)（已申請(qǐng)專利并獲得授權(quán)）。 其二是在AcAP5基礎(chǔ)上改造的蛋白TBN（已申請(qǐng)專利），具有溶栓和神經(jīng)保護(hù)作用功能。體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)表明AcAP5和TBN均具有較好的溶栓（溶解動(dòng)脈血栓）、抗栓（預(yù)防腦中風(fēng)血栓溶解過(guò)程中血栓再形成）和神經(jīng)保護(hù)作用（減小梗死體積），“三位一體”的功能使其具有更好的治療腦卒中效果。
北京大學(xué)
2021-01-12
結(jié)核分枝桿菌融合蛋白Mtb10.4-Hsp16.3的構(gòu)建.表達(dá)和純化方法及其應(yīng)用
本發(fā)明選擇結(jié)核桿菌生長(zhǎng)期和休眠期主要的保護(hù)性抗原Mtb10.4和Hsp16.3，構(gòu)建融合蛋白Mtb10.4-Hsp16.3（MH）。在大腸桿菌中表達(dá)純化該蛋白，將該蛋白和佐劑混合構(gòu)建亞單位疫苗，分別于BCG初免后12、14周加強(qiáng)免疫C57BL/6小鼠兩次，最后一次免疫6周后檢測(cè)細(xì)胞免疫反應(yīng)，最后一次免疫后10周進(jìn)行結(jié)核菌毒株H37Rv攻擊。結(jié)果：該融合蛋白能在大腸桿菌中穩(wěn)定大量表達(dá)，經(jīng)離子交換層析、凝膠過(guò)濾層析和疏水層析三步純化得到純度較高的蛋白；構(gòu)建的亞單位疫苗免疫動(dòng)物可產(chǎn)生針對(duì)結(jié)核桿菌特定抗原（Mtb10.4和Hsp16.3）的特異性細(xì)胞和體液免疫應(yīng)答，具有較強(qiáng)的免疫原性；毒株攻擊后，小鼠肺臟結(jié)核菌數(shù)量明顯少于PBS組和BCG組。結(jié)論：本發(fā)明成功構(gòu)建、表達(dá)和純化不帶任何標(biāo)簽的融合蛋白MH,此蛋白可誘導(dǎo)較強(qiáng)的細(xì)胞和體液免疫應(yīng)答并具有一定的動(dòng)物保護(hù)效應(yīng)，有望成為臨床結(jié)核病預(yù)防和治療的候選疫苗。
蘭州大學(xué)
2021-01-12
農(nóng)業(yè)大學(xué).jpg){kind=logo}
來(lái)源于象耳豆根結(jié)線蟲的Mesp1蛋白及其編碼基因和應(yīng)用
本發(fā)明公開了一種來(lái)源于象耳豆根結(jié)線蟲的Mesp1蛋白及其編碼基因和應(yīng)用。本發(fā)明提供了Mesp1蛋白，是由序列表中序列1或序列3所示的氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)。編碼Mesp1蛋白的Mesp1基因也屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。本發(fā)明還保護(hù)Mesp1蛋白的應(yīng)用，為如下(c1)至(c3)中的至少一種：(c1)調(diào)控根結(jié)線蟲的寄生能力；(c2)調(diào)控根結(jié)線蟲的致病能力；(c3)調(diào)控根結(jié)線蟲的發(fā)育。本發(fā)明還保護(hù)一種培育轉(zhuǎn)基因植物的方法，包括如下步驟：將所述干擾Mesp1基因表達(dá)的物質(zhì)導(dǎo)入出發(fā)植物，得到轉(zhuǎn)基因植物；所述轉(zhuǎn)基因植物對(duì)根結(jié)線蟲的抗性高于所述出發(fā)植物。本發(fā)明對(duì)于象耳豆根結(jié)線蟲致病機(jī)理研究以及抗線蟲植物制備具有重大價(jià)值。
中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)
2021-04-11
業(yè)大學(xué).jpg){kind=logo}
一種冰核蛋白-超聲波協(xié)同提高柑橘汁冷凍濃縮晶體成核溫度的方法
已有樣品/n一種冰核蛋白-超聲波協(xié)同提高柑橘汁冷凍濃縮晶體成核溫度的方法?！ 〕晒?jiǎn)介：一種冰核蛋白-超聲波協(xié)同提高柑橘汁冷凍濃縮晶體成核溫度的方法，屬于食品工程技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明具體涉及在-15-20℃下通過(guò)冷凍濃縮法來(lái)制備柑橘濃縮汁，將10-50μg/mL冰核蛋白溶解于柑橘汁中，同時(shí)施加頻極電流為0.2-0.5A的超聲波，超聲波頻率為25MHz，超聲波處理時(shí)間為0.5-2min，通過(guò)適當(dāng)?shù)臄嚢枋垢涕僦艿骄鶆虻某暡ㄗ饔茫軌蛱岣吒涕僦鋬鰸饪s晶體成核溫度5-8℃，并且快速形成冰晶。本發(fā)明方法節(jié)能
華中農(nóng)業(yè)大學(xué)
2021-01-12
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一種抗蛋白吸附毛細(xì)管電泳共價(jià)鍵合涂層柱的制備方法
本發(fā)明提供一種抗蛋白吸附毛細(xì)管電泳共價(jià)鍵合涂層柱的制備方法。利用聚苯乙烯磺酸鈉和感光聚合物重氮樹脂的靜電自組裝和光固化交聯(lián)反應(yīng)在石英毛細(xì)管柱的內(nèi)壁上構(gòu)筑共價(jià)鍵合抗蛋白吸附涂層。所制備的毛細(xì)管電泳涂層柱具有良好的抗蛋白吸附性能，與未涂層的石英毛細(xì)管裸柱相比，對(duì)蛋白質(zhì)的分離性能提高1倍以上。本方法所用工藝流程簡(jiǎn)單，生產(chǎn)效率高，生產(chǎn)成本低，重復(fù)性好，無(wú)毒環(huán)保，易于大規(guī)模生產(chǎn)，制得的共價(jià)鍵合毛細(xì)管電泳涂層柱具有優(yōu)良的化學(xué)穩(wěn)定性和抗蛋白吸附性能，適用于對(duì)蛋白質(zhì)、糖蛋白、肽鏈、激素、酶等生物的樣品的電泳分離檢測(cè)和純化。毛細(xì)管電泳涂層柱、產(chǎn)品附加值高。
青島大學(xué)
2021-04-13
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一種高穩(wěn)定性蛋白質(zhì)-殼聚糖復(fù)凝聚交聯(lián)微膠囊及其制備方法
本發(fā)明提供了一種高穩(wěn)定性蛋白質(zhì)?殼聚糖復(fù)凝聚交聯(lián)微膠囊及其制備方法，首先將芯材與不含還原糖的或含有還原糖的蛋白質(zhì)溶液混合，高速分散形成O/W型乳狀液，再加入殼聚糖溶液，調(diào)節(jié)pH，讓蛋白質(zhì)與殼聚糖通過(guò)靜電相互作用發(fā)生復(fù)凝聚反應(yīng)，形成復(fù)凝聚相沉降在芯材乳滴周圍而得到微膠囊，離心收集微膠囊，加熱，使蛋白質(zhì)?殼聚糖、蛋白質(zhì)?殼聚糖?還原糖兩兩之間發(fā)生美拉德反應(yīng)引發(fā)交聯(lián)而提高微膠囊的穩(wěn)定性。本發(fā)明簡(jiǎn)單易行、安全、高效，適于大規(guī)模生產(chǎn)；本發(fā)明可廣泛用于具有良好熱穩(wěn)定性芯材的包埋，對(duì)于開發(fā)高穩(wěn)定性的蛋白質(zhì)?殼聚糖復(fù)凝聚微膠囊體系和推進(jìn)復(fù)凝聚微囊化技術(shù)在食品工業(yè)中的實(shí)際應(yīng)用具有重要意義。
青島農(nóng)業(yè)大學(xué)
2021-04-13
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利用秸稈和廢棄動(dòng)物蛋白制造木霉固體菌種及木霉全元生物有機(jī)肥
本成果發(fā)明了以秸稈和廢棄動(dòng)物蛋白酸解氨基酸為原料，物料和空間均無(wú)需嚴(yán)格滅菌下大規(guī)模制造木霉固體菌種的技術(shù)工藝，突破了木霉全元生物有機(jī)肥制造技術(shù)瓶頸。
一、項(xiàng)目分類
顯著效益成果轉(zhuǎn)化
二、成果簡(jiǎn)介
木霉生物量大、根表定殖能力強(qiáng)、次生代謝產(chǎn)物種類多和含量高，促生和生防效果比細(xì)菌更顯著，但木霉在液體擴(kuò)繁后期不能有效產(chǎn)孢，需再進(jìn)行固體發(fā)酵才能獲得高濃度木霉固體菌種，傳統(tǒng)工藝原料貴、物料嚴(yán)格滅菌成本高，難以擴(kuò)大規(guī)模，這是木霉生物有機(jī)肥產(chǎn)業(yè)中的技術(shù)瓶頸。本成果發(fā)明了以秸稈和廢棄動(dòng)物蛋白酸解氨基酸為原料，物料和空間均無(wú)需嚴(yán)格滅菌下大規(guī)模制造木霉固體菌種的技術(shù)工藝，突破了木霉全元生物有機(jī)肥制造技術(shù)瓶頸。
南京農(nóng)業(yè)大學(xué)
2022-07-25