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本成果獲得 2015 年青島市科技進步獎二等獎。水貂巴氏桿菌病 蜂膠滅活苗，在傳統的水貂巴氏桿菌滅活疫苗的基礎上加入蜂膠，加入蜂膠后 的疫苗在使用上更加安全，在免疫效果上更加好，在同類滅活疫苗的研制上處 于領先水平，此項目在其他細菌疫苗研制上也提供了有價值的借鑒作用。本成青島農業大學科技成果介紹 2017 －35－ 果主要應用于水貂的巴氏桿菌病的預防，投入生產使用后將高效安全的預防水 貂巴氏桿菌病的發生，為廣大水貂養殖戶提供高的經濟保障，因為水貂巴氏桿 菌病蜂膠滅活苗在生產上操作相對簡單便于大規模生產，對生產商來講有著較 其他疫苗所沒有的優勢。 生產條件及市場預期：水貂巴氏桿菌病是水貂的常發病，主要影響水貂的 呼吸系統引起水貂的肺炎是其主要的特征，發病率高致死率也高對水貂的養殖 影響嚴重。水貂巴氏桿菌病蜂膠滅活苗，能夠有效預防此病，因其操作簡單因 而能夠及時預防和治療水貂巴氏桿菌病。有肺炎的病貂會嚴重影響貂皮的質量， 所以水貂巴氏桿菌病蜂膠滅活疫苗在預防巴氏桿菌病保障養殖戶經濟效益的同 時，也為社會提供了優質的貂皮，所以此疫苗有著廣闊的經濟和社會效益。 

未經殺菌的桶裝啤酒和扎啤在夏天的運輸、銷售過程中其質量難以保證。啤酒瞬時巴氏殺菌機是保證啤酒保質期的必備設備。通過巴式瞬時殺菌，可將生啤酒在夏天的保質期提高到3~5天，有利于中長途運輸和銷售。殺菌單位達到25PU。由于對啤酒的熱作用時間短，經過瞬時殺菌的啤酒可保持生啤的原有風味。設備簡單，價格為同類進口產品價格的1/5左右。目前已完成中試，可在生產中應用。同一生產能力的殺菌機包括三種型號：手動控制型、儀表自動控制型和計算機自動控制型。

目前，沙門菌的檢測主要還是采用傳統的細菌學方法，通過前增菌、選擇性增菌、分離培養、生化試驗以及血清學鑒定的步驟一步一步進行檢測，工作量大且耗時長。PCR及Real Time PCR等分子生物學技術雖然具有快速、簡便等大量優點，卻較少應用，主要原因是以DNA為模版的PCR及Real Time PCR技術并不能區分細菌的死活細胞，樣品中存在的死細胞可能導致假陽性結果。本課題將EMA對死活細胞的鑒別作用與Real Time PCR的靈敏度、特異性相結合，有效克服了DNA分子檢測手段不能鑒別死活細胞的弊端，在實現檢測的快速、簡便的同時大大提高了結果的準確性。確證了EMA-Real Time PCR可實現實際樣品中沙門菌活細胞的快速測定，可將EMA-Real Time PCR推廣到實際檢測工作中，如此便可大大縮短檢測所需的時間，節省大量的人力、物力。研究成果具有重大的應用前景。 社會效益：EMA-Real Time PCR可用于實際樣品中沙門菌活細胞的快速檢測，建立一種快速檢測病原菌的新方法體系，用于實際的檢測工作中，如此不僅可以減少食品安全日常監測的工作量，更重要的是，在突發性食物中毒事件中，大大縮短了病原菌檢測所需時間，提高了反應效率，為突發性公共衛生事件的解決提供更好的技術平臺。

胞內寄生性單增李斯特菌和綿羊李斯特菌能在吞噬細胞等抗原遞呈細胞內繁殖，引發高水平的抗原遞呈作用，分別通過MHCⅠ和Ⅱ類途徑引起宿主抗原特異性的CD8+和CD4+ T細胞免疫反應，建立長期有效的免疫保護記憶，因此可作為一種通用的疫苗載體。本項目以上述兩種李斯特菌為活菌載體搭建新型疫苗構建通用平臺，該平臺具有以下優勢：生物安全——敲除了菌株致病基因，降低了毒性；外源蛋白表達穩定——外源抗原基因整合至細菌基因組，永遠不會丟失；外源抗原具有分泌性——抗原基因融合有分泌信號肽，使蛋白能分泌到胞外，更有利于免疫刺激；對環境、公共健康安全——重組疫苗菌株不攜帶耐藥基因，不會給環境和公共健康帶來危害。本平臺技術目前已獲得授權專利，成果屬于國際先進水平，已在結核疫苗及豬繁殖與呼吸綜合癥病毒疫苗的研制上應用。該平臺還可應用于腫瘤治療性疫苗及其他預防病毒和慢性細菌感染的疫苗的研發，是一種通用的疫苗構建平臺。

（一）蠟樣芽孢桿菌蠟樣芽孢桿菌NJYH63305是團隊自行篩選的有益芽孢桿菌，廣泛應用于農業、醫藥、食品保健、飼料等領域。在農業領域，是一種集抑菌、殺蟲、促生于一體的環境友好型高效生防制劑，對茶輪斑病菌、黃瓜枯萎病菌、立枯絲核菌、煙草赤星病菌、茶云紋葉枯病菌、小麥全蝕病菌、小麥紋枯病、尖鐮孢菌、鐮刀菌、終極腐霉菌等植物病害及小菜蛾具有較強抑制作用。在醫藥領域，可調節人體腸道微生態平衡，適于治療急慢性痢疾、腸炎、腹瀉、嬰幼兒腹瀉引起的腸功能紊亂等；在食品保健領域，可作為食品添加劑，長期服用能促進營養物質的消化吸收，減少腸道疾病的發生，提高免疫能力、增強抗病能力。 1、蠟樣芽孢桿菌國內外研究進展目前，國內外蠟狀芽孢桿菌研究大多處于實驗室內研究階段，其商品化并應用于農業防治的實例較少。國內市場上蠟樣芽孢桿菌農用制劑大部分為復配試劑，同時其大規模培養過程中也存在不少問題，如發酵放大過程信息采集困難、制劑有效期不長、產品貨架期短等，這些問題的深入研究對解決蠟樣芽孢桿菌高密度培養瓶頸、降低蠟樣芽孢桿菌生產成本、促進細胞大規模培養領域重大突破具有重要意義。2、本課題組技術優勢（1）團隊以項目為紐帶，建立了蠟樣芽孢桿菌在線監控的高密度培養與多階段發酵集成技術，在1000L發酵罐上蠟樣芽孢桿菌活菌數高達800億個/g, 比初始培養提高了230%，達國際領先水平；（2）篩選的芽孢保護劑，可提高蠟樣芽孢桿菌活性，延長半衰期40％以上；（3）協同江蘇省農科院及南京農業技術推廣站進行綠色防控技術推廣，于江蘇浦口林大蔬菜基地、江寧區湖熟街道設施蔬菜基地、溧水傅家邊茶廠等地建立2800畝示范區，重點試驗核心區460畝。推廣示范區內，蠟樣芽孢桿菌對水稻紋枯病、灰霉病、晚疫病等真菌病害抑制率達51.8％～85.9％，與蘇云金芽孢桿菌（Bt）進行增效試驗，小菜蛾殺滅率提高29%，降低化學農藥使用量50％以上，農藥殘留量低于國家無公害農產品標準；（4）目前已在國內外重要期刊發表學術論文10余篇，出版專著《高效有益微生態制劑開發與利用——蠟樣芽孢桿菌》，申請國家發明專利4項，授權3項，其中3項（ZL200910028025.1、ZL201010579133.0、ZL200910028320.7）在南京新百藥業有限公司成功實現轉化。（二）凝結芽孢桿菌團隊自行篩選獲得一株益生凝結芽胞桿菌NJYHHWG 877005，除具有和乳酸菌及雙歧桿菌同樣的保健功效外，還具有耐酸、耐熱、耐鹽、容易培養和保存的特點。凝結芽孢桿菌為兼性厭氧菌，進入腸道后會消耗游離氧，有利于厭氧微生物乳酸菌和雙歧桿菌的生長，多用于調節腸道內微生態菌群平衡，團隊自主知識產權的凝結芽胞桿菌NJYHHWG 877005對甜瓜枯萎病菌、番茄早疫病菌、西瓜炭疽病菌等有很強的防治效果，可進行新型高效生物農藥的開發。

研發階段/n一種豬藍耳病基因重組豬霍亂沙門氏菌疫苗及應用。　　成果簡介：沙門氏菌是一種胞內寄生的革蘭氏陰性腸道桿菌，具有侵襲性。減毒沙門氏菌為載體的基因工程疫苗具有無法比擬的優越性，口服該種基因工程疫苗可以在激發產生抗沙門氏菌免疫應答的同時誘發特異性針對外源蛋白的體液和細胞免疫。豬藍耳病是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）引起的一種以妊娠母豬繁殖障礙以及仔豬呼吸道疾病的高度接觸傳染病，可對豬場造成巨大的損失。本發明涉及一種豬藍耳病基因重組豬霍亂沙門氏菌疫苗及應用，屬于動物細菌基因工程技術領域，具

魏氏梭菌能引起各種動物壞死性腸炎、腸毒血癥、人畜創傷性壞 疽以及人類食物中毒，快速、低成本、定量檢測人體內的 α 毒素對于 預防和診斷魏氏梭菌感染至關重要。本項目涉及的魏氏梭菌病及其致 病菌型的膠體硒檢測試紙能單獨或同時完成魏氏梭菌病的早期診斷 和各種致病菌的分型鑒定, 可應用于獸醫臨床、畜牧養殖、食品安全、 公共衛生、水質監測及相關領域，具有操作簡單、敏感特異、攜帶方 便等特點，有廣闊的市場前景與經濟效益潛力。

本實用新型屬于水產品加工機械技術領域，具體涉及一種水產品微波巴氏循環殺菌裝置。包括微波源、連接波導、功率分配器、角錐喇叭、介質耦合窗和諧振腔腔體；諧振腔腔體的兩端上下兩側對稱連接有介質耦合窗，諧振腔腔體左端部的介質耦合窗左側上部為進料口，右端部的介質耦合窗右側下部為出料口；諧振腔腔體內部設有兩條平行的傳送帶，諧振腔腔體內部側壁、出料口上方、轉角輥右側設有抓桿，抓桿與液壓桿相連；諧振腔腔體左端底部設有循環水進口，右端頂部設有循環水出口。本裝置通過將微波殺菌與水浴巴氏殺菌方式相結合，用循環水作為加熱殺菌介質，減緩微波加熱升溫速度，提高了殺菌后水產品的綜合品質。