一種基于相分離技術的藥物篩選方法

生物、醫藥及醫療機械

1.痛點問題

目前已存在多種高通量篩選互作蛋白及互作調控物的技術，其中被學術界和工業界廣泛運用的體外技術主要包括：熒光偏振、表面等離子共振、熒光共振能量轉移(FRET、NanoBRET)、Alpha技術（如AlphaScreen）等，但相關技術均存在一定局限：例如，細胞水平實驗試劑成本較高、生化實驗存在一定假陽性率等。本項成果提供了一種新的不同于已有機制的化合物篩選方法，有利于更好的進行復雜蛋白-蛋白相互作用的評估。

2.解決方案

利用對生物大分子的高度富集效應以及相變液滴易于觀察的特性，將微觀的分子互作通過宏觀的相變現象表現出來，在細胞層面建立了生物大分子的互作檢測及高通量篩選互作調控物的新技術體系。

由于本項成果處于行業轉化的早期階段，無法直接投入使用并開展技術服務，對此未來將采取一系列優化工作，包括采購高內涵篩選相關設備、開發優化通用型方法并搭建體外藥物篩選平臺，招募并培訓技術員團隊、建立方法學開發與驗證流程，數據完整性與可溯源性體系及團隊管理體系，提升整體服務通量等。

現有技術中蛋白-蛋白互作的鑒定及靶向蛋白互作的小分子調控物篩選各自獨立且均費時費力。本項成果利用一種基于液-液相分離的蛋白互作及高通量篩選體系，巧妙地將二者聯系在一起，實現了“一體系多用途”。由于微觀的蛋白互作及調控發生在液滴內且被轉化為直觀的熒光信號，因而具有可視性強、靈敏度高的優點。在特異性方面，招募進入區室并在其中進行濃縮需要能量輸入以補償由于濃度梯度而產生的熵增，因而只有通過有效結合特定結合伴侶的分子才能被募集，從而確保了特異性。在效率方面，蛋白質相互作用的信號可以在細胞內輕松可靠地檢測到，而無需進行耗時的蛋白純化等體外實驗。再者，本項成果操作過程簡單易行且成本低廉。