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青島農(nóng)業(yè)大學(xué)
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一種魚(yú)腸道微生物宏基因組總DNA的提取方法及試劑盒
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項(xiàng)目成果/簡(jiǎn)介:
本發(fā)明提供的一種魚(yú)腸道微生物宏基因組總DNA的提取方法及試劑盒，其包括：(1)魚(yú)樣品取樣及魚(yú)體表微生物固定處理；(2)腸道微生物的獲取及菌體的收集；(3)細(xì)胞的包埋與裂解；(4)DNA的提取；(5)DNA保存。試劑盒主要成分：溶液A：為T(mén)ris、EDTA的混合溶液；B為T(mén)ris、EDTA、NaCl、PVP、異硫氰酸胍、Triton?X100、PMSF、β?巰基乙醇的混合溶液；C為T(mén)ris、EDTA、NaCl和DTT的混合溶液；溶液D為蛋白酶K、溶菌酶、Tris、NaCl、SDS的混合溶液；E為T(mén)ris飽和酚和氯仿混合液；F為異丙醇；G為乙醇水溶液。本發(fā)明得到的DNA片段純度高，宿主及宿主體表微生物DNA含量少。
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